細(xì)胞簡介：

雞滑膜分離自滑膜組織；滑膜組織是位于關(guān)節(jié)腔內(nèi)面的內(nèi)襯結(jié)構(gòu)，各種關(guān)節(jié)內(nèi)疾病均會累及滑膜。而滑膜細(xì)胞是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu)，同時(shí)在各種關(guān)節(jié)疾患中也是主要病變部位。骨關(guān)節(jié)炎（OA）以關(guān)節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣鳎洳±砀淖兝奂瓣P(guān)節(jié)的各個(gè)組成部分，但絕不僅局限于軟骨，還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響，相互作用，共同加速關(guān)節(jié)的退變。滑膜細(xì)胞是構(gòu)成滑膜層的大細(xì)胞群體，是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu)，它包埋在顆粒狀無定性的基質(zhì)中，基質(zhì)內(nèi)有分散的纖維分布。滑膜由A型（巨噬樣滑膜細(xì)胞）、B型（成纖維樣滑膜細(xì)胞）以及C型（樹突細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞）細(xì)胞組成。滑膜細(xì)胞主要功能：①滑膜細(xì)胞產(chǎn)生潤滑液成分，并且與關(guān)節(jié)腔的吸收和血液/潤滑液交換有關(guān)；②滑膜細(xì)胞增生，表現(xiàn)為不依賴于支持物生長，并且分泌大量的效應(yīng)分子來促進(jìn)炎癥和關(guān)節(jié)損壞；③是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡(luò)中效應(yīng)因子的一部分。

方法簡介：

實(shí)驗(yàn)室分離的雞滑膜采用混合酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實(shí)驗(yàn)室分離的雞滑膜經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

雞滑膜體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞傳代步驟：

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

細(xì)胞凍存步驟:

待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠可溶性CD80(sCD80/B7-1)試劑盒 ，英文名： sCD80/B7-1 ELISA Kit

Mice colorectal cancer aigen (CCA) ELISA Kit 小鼠結(jié)腸癌抗原(CCA)試劑盒

MouseCathepsinK,cath-KELISAKit 小鼠組織蛋白酶K(cath-K)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanparathyroidhormone-likeprotein,PLPELISAKit人甲狀旁腺激素樣蛋白

同位素RNA北方雜交試劑盒5次

ELISAKitPL-A2大鼠0脂酶A2

山羊免疫球蛋白A   英文名稱：   Immunoglobulin A   英文縮寫：   IgA

山羊   英文名稱：   Coisol   英文縮寫：   CO

山羊β   英文名稱：   β-Hydroxybyrate   英文縮寫：   Β-OHB

山羊胰島素   英文名稱：   lnsulin   英文縮寫：   INS

T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子TFEB抗體

豚鼠前列腺素E2(PGE2)試劑盒 ，英文名： PGE2 ELISA Kit

Human cytokeratin low molecular weight (CK-LMW) ELISA Kit 人低分子量細(xì)胞角蛋白(CK-LMW)試劑盒

Monkeybrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBKELISAKit大鼠血管舒緩激肽

細(xì)菌尿肉湯500毫升

Rabbitleoopichormone,LHELISAKit兔子促黃體激素(LH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

磷酸化神經(jīng)生長相關(guān)蛋白43抗體

HA重組甲型流感 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

PMP2/FABP8(peripheral myelin protein 2 0.5mgPMP2/FABP8(peripheral myelin protein 2) 周圍神經(jīng)髓鞘蛋白2抗原

SERPINE1重組人 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 Protein

IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His 標(biāo)簽)

雞滑膜細(xì)胞PMP2/FABP8(peripheral myelin protein 2 0.5mgPMP2/FABP8(peripheral myelin protein 2) 周圍神經(jīng)髓鞘蛋白2抗原

IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白

HA重組甲型流感 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His 標(biāo)簽)

SERPINE1重組人 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 Protein