犬臍帶間充質(zhì)干細胞

| 商品屬性：

| 細胞介紹：

犬臍帶間充質(zhì)干分離自臍帶；臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)。原來是由羊膜包卷著卵黃囊和尿膜的柄狀伸長部而形成的。臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。當卵黃囊及其血管退化，臍動脈和臍靜脈就發(fā)達起來，在這些間隙中可以看到疏松的膠狀的間充質(zhì)。在子宮中，子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管，與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動脈將胎兒來的廢物運送至胎盤，臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運送給胎兒。后由子宮靜脈將來自胎兒的代謝廢物運走，某種激素和抗體等也通過臍帶從母體移交給胎兒。臍帶中含有大量的干細胞，干細胞是生命的種子，它會分化成機體的各種細胞，結(jié)出各種不同的果實——血液細胞、神經(jīng)細胞、骨骼細胞等。干細胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體；這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數(shù)量，又可進一步分化為各種組織細胞，從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用。間充質(zhì)干細胞（MSC）是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細胞。在不同的誘導(dǎo)條件下，可分化為多種造血細胞以外的組織細胞，并具有造血支持、免疫調(diào)節(jié)、組織修復(fù)等作用；目前，多用于風濕免疫疾病的治療。間充質(zhì)干細胞（MSCs）是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細胞，存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細胞因子及生長因子，促進造血干細胞（HSC）的增殖與分化。MSCs還具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎和組織修復(fù)作用，可減輕移植物抗宿主病（GVHD）及其他移植相關(guān)并發(fā)癥。

| 方法簡介：

實驗室分離的犬臍帶間充質(zhì)干采用組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

| 質(zhì)量檢測：

實驗室分離的犬臍帶間充質(zhì)經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

| 培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳3-5代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

犬臍帶間充質(zhì)干體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

| 細胞培養(yǎng)操作：

1）復(fù)蘇細胞：將含有細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
| 公司正在出售的產(chǎn)品

大鼠鈣調(diào)素(CAM)試劑盒 ，英文名： CAM ELISA Kit

Lester pig mononucleosis septozotocin (listeriolysin) ELISA Kit 豬單核細胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)試劑盒

轉(zhuǎn)基因植物NPTⅡ基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMCP-2/CCL8(Humanmonocytechemotacticprotein2)ELISAkit人單核細胞趨化蛋白2

體液腺苷酸環(huán)化酶(AdenylateCyclase)活性熒光定量試劑盒20次

ELISAKitIFN-α貓α干擾素

含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

脫氫酶測試盒   紫外分光光度法   50管/48樣

還原糖含量測試盒   可見分光光度法   50管/24樣

纖維素酶（CL）測試盒   可見分光光度法   50管/24樣

HERC3 E3泛素蛋白連接酶抗體

豚鼠免疫球蛋白G2(IgG2)試劑盒 ，英文名： IgG2 ELISA Kit

Human granulysin (histatin 5) ELISA Kit 人富組蛋白(histatin 5)試劑盒

rabbitImmunoglobulinG,IgGELISAKit 兔子免疫球蛋白G(IgG)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBAFF-R(HumanBcellactivationfactorrfromthetumornecrosisfactorfamilyreceptor)ELISAKit人B細胞活化因子受體

線蟲補骨脂素(4-imethylpsoralen)誘導(dǎo)突變試劑盒10次

Rabbitcatecholamine,CAELISAKit兔兒茶酚胺(CA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

DNA聚合酶μ/DNA pol μ抗體

IGFBP3重組人 IGFBP3 / IBP3 蛋白 Protein

結(jié)合蛋白4(RBP4)重組蛋白 Recombinant Retinol Binding Protein 4, Plasma (RBP4)

CD48重組人 CD48 / SLAMF2 / BCM1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

IL17RA Protein Human 重組人 IL17RA / CD217 蛋白

HA Protein H12N5 重組甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

犬臍帶間充質(zhì)干細胞結(jié)合蛋白4(RBP4)重組蛋白 Recombinant Retinol Binding Protein 4, Plasma (RBP4)

IL17RA Protein Human 重組人 IL17RA / CD217 蛋白

IGFBP3重組人 IGFBP3 / IBP3 蛋白 Protein

HA Protein H12N5 重組甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

CD48重組人 CD48 / SLAMF2 / BCM1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

| 注意事項：

1. 收到非紅系有核細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細胞因子 等，確保細胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問 題，責任由客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均 會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養(yǎng)，待ATCC CRL-1711(Sf9)細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián) 系，告知細胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7.該細胞僅供科研使用