熒光素標記血管內(nèi)皮細胞粘附分子抗體IgG動物體內(nèi)單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動物體內(nèi)單抗的方法,鑒于絕大多數(shù)動物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細胞與同品系的脾細胞融合而得,因此使用的動物當然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細胞接種于小鼠腹腔內(nèi),在小鼠腹腔內(nèi)生長雜交瘤,并產(chǎn)生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡便、經(jīng)濟,不過,腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動物病毒的危險,故而用SPF級小鼠。熒光素標記血管內(nèi)皮細胞粘附分子抗體IgGA、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液體石蠟。c. 處于對數(shù)生*的雜交瘤細胞。
B、方法:a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產(chǎn)生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時,皮膚有緊張感,即可用16號針頭采集腹水,一般可連續(xù)采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細胞成分和其他的沉淀物,收集上清,公司產(chǎn)品詳情請參閱有關(guān)詳細論述鏈接點擊:
Anti-Osx (Osterix)??成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體
anti-Os05g/0477200 protein??抗水稻白葉枯病菌Os05g0477200蛋白抗體
anti-OTR(oxytocin receptor)??*受體抗體
Anti-OVA??雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體
Anti-OXR (Orexin receptor)??食欲素受體抗體
Anti-P14ARF??抑癌基因p14抗體
Anti-P16/CDKN2A (Cyclin-dependent kinase inhibitor-2A)??抑癌基因p16抗體
Anti-P19ARF??p19ARF抑癌基因抗體
Anti-P21/WAF1/CIP1??p21抗體
Anti-P27/kip1 (cyclin-dependent kinase inhibitor 1B)??P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑
(2) 體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講,雜交瘤細胞系并不是嚴格的貼壁依賴細胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進行單層細胞培養(yǎng),又可以進行懸浮培養(yǎng)。雜交瘤細胞的單層細胞培養(yǎng)法是各個實驗室zui常用的手段,即將雜交瘤細胞加入培養(yǎng)瓶中,以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng),細胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養(yǎng)上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗,就必須進行雜交瘤細胞的大量(高密度)培養(yǎng)。單位體積內(nèi)細胞數(shù)量越多,細胞存活時間越長,單抗的濃度就越高,產(chǎn)量就越大。
上海撫生實業(yè)有限公司
Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.
成立于2012年,經(jīng)過數(shù)年的努力已迅速成為集科研和為一體的專業(yè)化生物工程公司。特別是ELISA,代測,技術(shù)服務(wù)這一產(chǎn)品已使上海撫生成為中國公司。
公司產(chǎn)品涵蓋ELISA、細胞培養(yǎng),各種生化試劑、各種酶類、分子生物學(xué)試劑盒、培養(yǎng)基、自產(chǎn)實驗室耗材、小型儀器等。此外、上海撫生還代理了美國藥典標準品,中檢所標準品,sigma,ScienCell,ATCC,wak0,omega,Worthington、MBI、Bioworld、Calendon等國外各類公司的產(chǎn)品。
上海撫生將進一步加強人才經(jīng)營、產(chǎn)品經(jīng)營,不斷提升企業(yè)的核心竟爭力,實現(xiàn)具有產(chǎn)業(yè)體系、知識化創(chuàng)業(yè)團隊的化的公司,服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域,迎接世界經(jīng)濟一體化所帶來的機遇與挑戰(zhàn)。
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