熒光素標記血管內皮生長因子受體2抗體IgG動物體內單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動物體內單抗的方法,鑒于絕大多數動物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細胞與同品系的脾細胞融合而得,因此使用的動物當然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細胞接種于小鼠腹腔內,在小鼠腹腔內生長雜交瘤,并產生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡便、經濟,不過,腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動物病毒的危險,故而用SPF級小鼠。熒光素標記血管內皮生長因子受體2抗體IgGA、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液體石蠟。c. 處于對數生*的雜交瘤細胞。
B、方法:a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養基稀釋的雜交瘤細胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時,皮膚有緊張感,即可用16號針頭采集腹水,一般可連續采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細胞成分和其他的沉淀物,收集上清,公司產品詳情請參閱有關詳細論述鏈接點擊:
大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ,TNFsR-ⅠELISA試劑盒 Rat Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ,TNFsR-Ⅰ ELISA試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ,TNFsR-ⅡELISA試劑盒 Rat Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ,TNFsR-Ⅱ ELISA試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子β,TNF-βELISA試劑盒 Rat Tumor necrosis factor β,TNF-β ELISA試劑盒
小鼠L選擇素,L-Selectin/CD62LELISA試劑盒 Mouse L-Selectin ELISA試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1,TRAIL-R1ELISA試劑盒 Rat tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 1,TRAIL R1 ELISA試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3,TRAIL-R3ELISA試劑盒 Rat tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,TRAIL R3 ELISA試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體4,TRAIL-R4ELISA試劑盒 Rat tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 4,TRAIL R4 ELISA試劑盒
大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體,sTRAILELISA試劑盒 Rat soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,sTRAIL ELISA試劑盒
大鼠*型纖溶酶原激活物,uPAELISA試劑盒 Rat urokinase plasminogen activator,uPA ELISA試劑盒
大鼠*型纖溶酶原激活物受體,PLAUR/uPARELISA試劑盒 Rat Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor,PLAUR/uPAR ELISA試劑盒
大鼠白介素12,IL-12/P70ELISA試劑盒 Rat Interleukin 12,IL-12/P70 ELISA試劑盒
大鼠血管內皮細胞生長因子B,VEGF-BELISA試劑盒 Rat Vascular Endothelial cell Growth Factor B,VEGF-B ELISA試劑盒
(2) 體外培養單抗的方法總體上講,雜交瘤細胞系并不是嚴格的貼壁依賴細胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進行單層細胞培養,又可以進行懸浮培養。雜交瘤細胞的單層細胞培養法是各個實驗室zui常用的手段,即將雜交瘤細胞加入培養瓶中,以含10-15%小牛血清的培養基培養,細胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無疑是不適用于單抗的大規模。要想在體外大量制備單抗,就必須進行雜交瘤細胞的大量(高密度)培養。單位體積內細胞數量越多,細胞存活時間越長,單抗的濃度就越高,產量就越大。
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