豚鼠一氧化氮(NO)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在豚鼠一氧化氮(NO)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。
9853 抗突觸前膜受體抗體(PsmRAb)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Anti-Presynaptic Membrane Receptor Antibody (PsmRAb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9854 肌聯(lián)蛋白(TTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Titin (TTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9855 肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CACT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carnitine Acylcarnitine Translocase (CACT) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9856 脂肪酸轉(zhuǎn)運蛋白5(FATP5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fatty Acid Transport Protein 5 (FATP5) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9857 乳酸脫氫酶A(LDHA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lactate Dehydrogenase A (LDHA) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9858 檸檬酸合酶(CS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Citrate Synthase (CS) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9859 糖皮質(zhì)激素誘導腫瘤壞死因子受體(GITR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glucocorticoid Induced Tumor Necrosis Factor Receptor (GITR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9860 胰島素(INS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Insulin (INS) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
9861 熱休克蛋白47(HSP47)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Heat Shock Protein 47 (HSP47) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9862 *(LZM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysozyme (LZM) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9863 高爾基蛋白73(GP73)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Golgi Protein 73 (GP73) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9864 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glypican 3 (GPC3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9865 黑素瘤細胞黏附分子(MCAM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Melanoma Cell Adhesion Molecule (MCAM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9866 AMP激活蛋白激酶β1(PRKAβ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Kinase, AMP Activated Beta 1 (PRKAb1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9867 肺部激活調(diào)節(jié)趨化因子(PARC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pulmonary Activation Regulated Chemokine (PARC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9868 轉(zhuǎn)運蛋白1(TNPO1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transportin 1 (TNPO1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9869 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 6 (IGFBP6) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9870 白介素12B(IL12B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 12B (IL12B) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
9871 *釋放激素受體(GnRHR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Gonadotropin Releasing Hormone Receptor (GnRHR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9872 孕酮受體(PGR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Progesterone Receptor (PGR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9873 *1(KLK1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Kallikrein 1 (KLK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9874 通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡF肽1(GTF2F1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for General Transcription Factor IIF, Polypeptide 1 (GTF2F1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9875 TATA框結(jié)合蛋白關聯(lián)因子2(TAF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for TATA Box Binding Protein Associated Factor 2 (TAF2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9876 卵黃高磷蛋白(PV)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phosvitin (PV) 48T/96T Danio rerio (Zebrafish)
9877 免疫球蛋白G2(IgG2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Immunoglobulin G2 (IgG2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9878 細胞因子信號轉(zhuǎn)導抑制因子3(SOCS3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Suppressors Of Cytokine Signaling 3 (SOCS3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9879 整合素αM(ITGαM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Integrin Alpha M (ITGaM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9880 整合素αM(ITGαM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Integrin Alpha M (ITGaM) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9881 B-細胞激活因子(BAFF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for B-Cell Activating Factor (BAFF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9882 高密度脂蛋白(HDL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for High Density Lipoprotein (HDL) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9883 低密度脂蛋白(LDL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Low Density Lipoprotein (LDL) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9884 甘油三酯(TG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Triglyceride (TG) 48T/96T General
9885 白介素21(IL21)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 21 (IL21) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9886 白介素28A(IL28A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 28A (IL28A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9887 滲透性糖蛋白(Pgp)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Permeability Glycoprotein (Pgp) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9888 角蛋白10(KRT10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Keratin 10 (KRT10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9889 胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Thymus Activation Regulated Chemokine (TARC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9890 脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 4, Adipocyte (FABP4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9891 白介素25(IL25)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 25 (IL25) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9892 白介素26(IL26)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 26 (IL26) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9893 血管內(nèi)皮生長因子165(VEGF165)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor 165 (VEGF165) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9894 α1-抗*(α1AT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-1-Antitrypsin (a1AT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9895 乳酸脫氫酶B(LDHB)檢測試劑盒豚鼠一氧化氮(NO)ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lactate Dehydrogenase B (LDHB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9896 乳酸脫氫酶B(LDHB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lactate Dehydrogenase B (LDHB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5豚鼠一氧化氮(NO)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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