大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下，以期給客戶帶來一些啟發，提高試驗質量。
14491 Misato同源物1(MSTO1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Misato Homolog 1 (MSTO1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14492 腈水解酶2(NIT2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nitrilase 2 (NIT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14493 核仁蛋白58(NOP58)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nucleolar protein 58 (NOP58) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14494 仙人掌素(Cactin)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cactin 48T/96T Homo sapiens (Human)
14495 胰安肽(Aglycin)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aglycin 48T/96T Homo sapiens (Human)
14496 血管緊張素1-7(Ang1-7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Angiotensin 1-7 (Ang1-7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14497 透明質酸氨基葡糖苷酶1(HYAL1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hyaluronoglucosaminidase 1 (HYAL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14498 RPE脊椎蛋白(RPESP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for RPE Spondin (RPESP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14499 Sarcosynapsin蛋白(SRYP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sarcosynapsin (SRYP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14500 Shisa同源物5(SHISA5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Shisa Homolog 5 (SHISA5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14501 分離蛋白2(SCRN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Secernin 2 (SCRN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14502 分離蛋白3(SCRN3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Secernin 3 (SCRN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14503 信號素3G(SEMA3G)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Semaphorin 3G (SEMA3G) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14504 磷脂酶D6(PLD6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phospholipase D6 (PLD6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14505 Embigin蛋白(EMB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Embigin (EMB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14506 核糖核酸外切酶2(ERI2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Exoribonuclease 2 (ERI2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14507 筑絲蛋白4(TEKT4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tektin 4 (TEKT4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14508 皮質素2(CTXN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cortexin 2 (CTXN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14509 皮質素3(CTXN3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cortexin 3 (CTXN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14510 防御素β133(DEFβ133)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Defensin Beta 133 (DEFb133) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14511 葡糖酸激酶(GNTK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Gluconate Kinase (GNTK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14512 烯醇化酶4(ENO4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Enolase 4 (ENO4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14513 YY肽3(PYY3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Peptide YY 3 (PYY3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14514 Ropporin 1B蛋白(ROPN1B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ropporin 1B (ROPN1B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14515 線粒體GTP酶1(MTG1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mitochondrial GTPase 1 (MTG1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14516 *組合因子4(SERINC4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Serine Incorporator 4 (SERINC4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14517 3-羥基丁酸脫氫酶2(BDH2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for 3-Hydroxybutyrate Dehydrogenase 2 (BDH2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14518 寡糖轉移酶4(OST4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Oligosaccharyltransferase 4 (OST4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14519 失調蛋白8(ATXN8)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ataxin 8 (ATXN8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14520 *過氧化酶8(GPX8)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 8 (GPX8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14521 Paralemmin 3蛋白(PALM3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Paralemmin 3 (PALM3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14522 絲聚蛋白2(FLG2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Filaggrin 2 (FLG2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14523 脂質運載蛋白15(LCN15)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lipocalin 15 (LCN15) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14524 防御素β132(DEFβ132)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Defensin Beta 132 (DEFb132) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14525 L-天冬氨酸脫氫酶(ASPDH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for L-Aspartate Dehydrogenase (ASPDH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14526 Clarin 2蛋白(CLRN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Clarin 2 (CLRN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14527 癌調蛋白2(OCM2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Oncomodulin 2 (OCM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14528 雙調蛋白B(AREGB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Amphiregulin B (AREGB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14529 封閉蛋白24(CLDN24)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Claudin 24 (CLDN24) 48T/96T Homo sapiens大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)ELISA試劑盒 (Human)
14530 脂肪酸轉移酶2(LIPT2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lipoyltransferase 2 (LIPT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14531 RIO激酶2(RIOK2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for RIO Kinase 2 (RIOK2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質量優良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質量。
在實際操作中，除了選擇優良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內質控、室間質評，以嚴謹的工作作風檢測每一份標本，才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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