牛結核病抗體(TB-Ab)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在牛結核病抗體(TB-Ab)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
14655 整合素α7(ITGα7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Integrin Alpha 7 (ITGa7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14656 整合素α8(ITGα8)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Integrin Alpha 8 (ITGa8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14657 整合素α9(ITGα9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Integrin Alpha 9 (ITGa9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14658 整合素α10(ITGα10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Integrin Alpha 10 (ITGa10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14659 整合素α11(ITGα11)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Integrin Alpha 11 (ITGa11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14660 整合素β5(ITGβ5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Integrin Beta 5 (ITGb5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14661 整合素β7(ITGβ7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Integrin Beta 7 (ITGb7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14662 整合素β8(ITGβ8)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Integrin Beta 8 (ITGb8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14663 腱蛋白(CHRD)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chordin (CHRD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14664 神經秩蛋白(NRTN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neurturin (NRTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14665 神經蛋白聚糖(NCAN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neurocan (NCAN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14666 早老素1(PSEN1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Presenilin 1 (PSEN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14667 連環蛋白α1(CTNNα1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Catenin Alpha 1 (CTNNa1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14668 兩性蛋白(AMPH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Amphiphysin (AMPH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14669 組蛋白脫乙酰基酶1(HDAC1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Histone Deacetylase 1 (HDAC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14670 Vav1癌基因(VAV1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vav 1 Oncogene (VAV1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14671 輔肌動蛋白α4(ACTN4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Actinin Alpha 4 (ACTN4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14672 Atrophin 1蛋白(ATN1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Atrophin 1 (ATN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14673 類固醇生成因子1(SF1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Steroidogenic Factor 1 (SF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14674 皮層肌動蛋白(CTTN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cortactin (CTTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14675 斑聯蛋白(ZYX)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Zyxin (ZYX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14676 輔肌動蛋白α1(ACTN1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Actinin Alpha 1 (ACTN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14677 脫氧核糖核酸酶Ⅱ(DNASEⅡ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Deoxyribonuclease II (DNASEII) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14678 Pirin蛋白(PIR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pirin (PIR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14679 輸出蛋白1(XPO1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Exportin 1 (XPO1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14680 融合蛋白(FUS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fusion (FUS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14681 7-脫氫*還原酶(DHCR7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for 7-Dehydrocholesterol Reductase (DHCR7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14682 氨基酰化酶1(ACY1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aminoacylase 1 (ACY1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14683 內收蛋白1(ADD1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adducin 1 (ADD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14684 腺苷激酶(ADK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adenosine Kinase (ADK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14685 腺苷酸激酶2(AK2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adenylate Kinase 2 (AK2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14686 無羊膜蛋白(AMN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Amnionless (AMN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14687 血管抑素結合蛋白(AMOT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Angiomotin (AMOT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14688 Attractin蛋白(ATRN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Attractin (ATRN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14689 失調蛋白2(ATXN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ataxin 2 (ATXN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14690 抗酶抑制因子1(AZIN1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Antizyme Inhibitor 1 (AZIN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14691 Aprataxin蛋白(APTX)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aprataxin (APTX) 48T/96T Homo sapiens 牛結核病抗體(TB-Ab)ELISA試劑盒(Human)
14692 天冬酰胺氨基葡萄糖酶(AGA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aspartylglucosaminidase (AGA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5牛結核病抗體(TB-Ab)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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