豬瘟抗原2板ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在豬瘟抗原2板ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。
14819 轉(zhuǎn)換蛋白2(TNP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transition Protein 2 (TNP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14820 轉(zhuǎn)運蛋白3(TNPO3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transportin 3 (TNPO3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14821 張力蛋白1(TNS1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tensin 1 (TNS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14822 原肌球蛋白1α(TPM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tropomyosin 1 Alpha (TPM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14823 營養(yǎng)蛋白(TRO)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Trophinin (TRO) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14824 轉(zhuǎn)位蛋白(TSN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Translin (TSN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14825 四旋蛋白3(TSPAN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tetraspanin 3 (TSPAN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14826 甲巰蛋白(TPN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tapasin (TPN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14827 硫嘌呤甲基轉(zhuǎn)移酶(TPMT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Thiopurine Methyltransferase (TPMT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14828 血栓烷受體(TP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Thromboxane Receptor (TP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14829 *(TMPO)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Thymopoietin (TMPO) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14830 成簇蛋白(TUFT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tufin (TUFT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14831 Sciellin蛋白(SCEL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sciellin (SCEL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14832 分離蛋白1(SCRN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Secernin 1 (SCRN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14833 同線蛋白1(ST1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syntenin 1 (ST1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14834 胞裂蛋白1(SEPT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Septin 1 (SEPT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14835 Sestrin 2蛋白(SESN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sestrin 2 (SESN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14836 Senataxin蛋白(SETX)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Senataxin (SETX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14837 Sideroflexin 1蛋白(SFXN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sideroflexin 1 (SFXN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14838 肌糖α(SGCα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sarcoglycan Alpha (SGCa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14839 精胺合酶(SMS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Spermine Synthase (SMS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14840 Smoothelin蛋白(SMTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Smoothelin (SMTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14841 錫蛋白(SNN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stannin (SNN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14842 互生蛋白β1(SNTβ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syntrophin Beta 1 (SNTb1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14843 Snurportin 1蛋白(SNUPN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Snurportin 1 (SNUPN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14844 紡錘體蛋白1(SPIN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Spindlin 1 (SPIN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14845 穩(wěn)定素1(STAB1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stabilin 1 (STAB1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14846 紅細胞膜蛋白7.2b(STOM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stomatin (STOM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14847 硬纖毛蛋白(STRC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stereocilin (STRC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14848 Surfeit 1蛋白(SURF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Surfeit 1 (SURF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14849 監(jiān)理蛋白(SVIL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Supervillin (SVIL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14850 偶對蛋白(SYMPK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Symplekin (SYMPK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14851 突觸蛋白Ⅰ(SYN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Synapsin I (SYN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14852 突觸回蛋白1(SYNGR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Synaptogyrin 1 (SYNGR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14853 突觸囊泡蛋白Ⅰ(SYT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Synaptotagmin I (SYT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14854 硒磷酸合成酶1(SEPHS1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Selenophosphate Synthetase 1 (SEPHS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14855 Smoothened蛋白(SMO)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Smoothened (SMO) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14856 痙攣蛋白(SPAST)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Spastin (SPAST) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14857 動力蛋白激活蛋白2(DCTN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dynactin 2 (DCTN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14858 脫氧輔蛋白合酶(DHPS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Deoxyhypusine Synthase (DHPS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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