偽狂犬病毒gE2.0抗體ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在偽狂犬病毒gE2.0抗體ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
14859 網狀蛋白1(RTN1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Reticulon 1 (RTN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14860 氧橋二十烷受體1(OXER1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Oxoeicosanoid Receptor 1 (OXER1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14861 環前列腺素受體(PTGIR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Prostacyclin Receptor (PTGIR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14862 蓋膜蛋白β(TECTβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tectorin Beta (TECTb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14863 窖蛋白2(CAV2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Caveolin 2 (CAV2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14864 窖蛋白3(CAV3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Caveolin 3 (CAV3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14865 鈣蛋白酶3(CAPN3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calpain 3 (CAPN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14866 鈣蛋白酶5(CAPN5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calpain 5 (CAPN5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14867 鈣蛋白酶9(CAPN9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calpain 9 (CAPN9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14868 鈣蛋白酶10(CAPN10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calpain 10 (CAPN10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14869 組織蛋白酶H(CTSH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cathepsin H (CTSH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14870 組織蛋白酶F(CTSF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cathepsin F (CTSF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14871 組織蛋白酶W(CTSW)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cathepsin W (CTSW) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14872 組織蛋白酶V(CTSV)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cathepsin V (CTSV) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14873 補體成分6(C6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Component 6 (C6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14874 *過氧化酶4(GPX4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 4 (GPX4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14875 水通道蛋白7(AQP7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aquaporin 7 (AQP7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14876 蘭尼定受體3(RYR3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ryanodine Receptor 3 (RYR3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14877 三合蛋白(TRDN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Triadin (TRDN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14878 突觸融合蛋白3(STX3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syntaxin 3 (STX3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14879 免疫球蛋白κ(Igκ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Immunoglobulin Kappa (Igk) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14880 免疫球蛋白J鏈(IgJ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Immunoglobulin J (IgJ) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14881 Apelin蛋白(APLN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apelin (APLN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14882 Apelin受體(APLNR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apelin Receptor (APLNR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14883 血紅蛋白α1(HBα1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hemoglobin Alpha 1 (HBa1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14884 血紅蛋白ζ(HBζ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hemoglobin Zeta (HBz) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14885 血紅蛋白δ(HBδ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hemoglobin Delta (HBd) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14886 血紅蛋白γ1(HBγ1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hemoglobin Gamma 1 (HBg1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14887 血紅蛋白ε1(HBε1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hemoglobin Epsilon 1 (HBe1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14888 血紅蛋白γ2(HBγ2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hemoglobin Gamma 2 (HBg2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14889 血紅蛋白α2(HBα2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hemoglobin Alpha 2 (HBa2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14890 血紅蛋白θ1(HBθ1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hemoglobin Theta 1 (HBq1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14891 血紅蛋白β(HBβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hemoglobin Beta (HBb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14892 磷脂爬行酶5(PLSCR5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phospholipid Scramblase 5 (PLSCR5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14893 糖蛋白M6B(GPM6B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glycoprotein M6B (GPM6B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14894 嗅素2(OLFM2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Olfactomedin 2 (OLFM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14895 嗅素1(OLFM1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Olfactomedin 1 (OLFM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14896 突觸蛋白Ⅱ(SYN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Synapsin II (SYN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14897 突觸蛋白Ⅲ(SYN3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Synapsin III (SYN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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