鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
16283 無翅型MMTV整合位點家族成員3A(WNT3A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3A (WNT3A) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16284 分泌型卷曲相關蛋白2(SFRP2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Secreted Frizzled Related Protein 2 (SFRP2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16285 胃泌素釋放肽(GRP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Gastrin Releasing Peptide (GRP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16286 羥烷基*脫氫酶β(HADHβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hydroxyacyl Coenzyme A Dehydrogenase Beta (HADHb) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16287 碳酸酐酶Ⅻ(CA12)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carbonic Anhydrase XII (CA12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16288 細胞色素P450家族成員11A1(CYP11A1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cytochrome P450 11A1 (CYP11A1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16289 周期素依賴性激酶6(CDK6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cyclin Dependent Kinase 6 (CDK6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16290 腫瘤易感基因101(TSG101)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tumor Susceptibility Gene 101 (TSG101) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16291 A類清道夫受體3(SCARA3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Scavenger Receptor Class A Member 3 (SCARA3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16292 淀粉樣前體蛋白(APP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Amyloid Precursor Protein (APP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16293 視紫質(RHO)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Rhodopsin (RHO) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16294 N-乙酰轉移酶8樣蛋白(NAT8L)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for N-Acetyltransferase 8 Like Protein (NAT8L) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16295 腱蛋白樣蛋白2(CHRDL2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chordin Like Protein 2 (CHRDL2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16296 白介素4(IL4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 4 (IL4) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
16297 NADH脫氫酶1(ND1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for NADH Dehydrogenase 1 (ND1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16298 *氧化酶亞基Ⅲ(COX3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cytochrome C Oxidase Subunit III (COX3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16299 脾臟*激酶(SYK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Spleen Tyrosine Kinase (SYK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16300 黑色素聚集激素受體1(MCHR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Melanin Concentrating Hormone Receptor 1 (MCHR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16301 δ樣蛋白1同源物(δLK1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Delta Like 1 Homolog (dLK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16302 重肽鐵蛋白(FTH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ferritin, Heavy Polypeptide (FTH) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16303 線粒體鐵蛋白(FTMT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ferritin, Mitochondrial (FTMT) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16304 二價金屬轉運蛋白1(DMT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Divalent Metal Transporter 1 (DMT1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16305 鐵反應元件結合蛋白2(IREB2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Iron Responsive Element Binding Protein 2 (IREB2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16306 順烏頭酸酶1(ACO1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aconitase 1 (ACO1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16307 蛋白酶激活受體1(PAR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protease Activated Receptor 1 (PAR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16308 *半*連接酶催化亞基(GCLC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutamate Cysteine Ligase, Catalytic (GCLC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16309 Mg2+/Mn2+依賴性蛋白磷酸酶1A(PPM1A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Phosphatase, Mg2+/Mn2+ Dependent 1A (PPM1A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16310 Mg2+/Mn2+依賴性蛋白磷酸酶1A(PPM1A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Phosphatase, Mg2+/Mn2+ Dependent 1A (PPM1A) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16311 組蛋白脫乙?;?(HDAC1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Histone Deacetylase 1 (HDAC1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16312 *1β(MEP1β)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Meprin A Beta (MEP1b) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16313 Bcl2關聯X蛋白(Bax)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Bcl2 Associated X Protein (Bax) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16314 血管生成素樣蛋白2(ANGPTL2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 2 (ANGPTL2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16315 抗肌萎縮蛋白(UTRN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Utrophin (UTRN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16316 鈉/鉀離子轉運ATP酶β4肽(ATP1β4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 4 Polypeptide (ATP1b4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16317 UDP葡萄糖神經酰胺葡萄糖基轉移酶(UGCG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for UDP Glucose Ceramide Glucosyltransferase (UGCG) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16318 半*豐富血管生成誘導因子61(CYR61)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cysteine Rich Protein, Angiogenic Inducer 61 (CYR61) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16319 UDP葡糖醛酸基轉移酶1家族多肽A1(UGT1A1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for UDP Glucuronosyltransferase 1 Family, Polypeptide A1 (UGT1A1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16320 視網膜血管瘤腫瘤抑制因子(vHL)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Von Hippel Lindau Tumor Suppressor (vHL) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16321 細胞色素P450家族成員2B6(CYP2B6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cytochrome P450 2B6 (CYP2B6) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16322 錨定蛋白重復域蛋白1(ANKRD1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ankyrin Repeat Domain Protein 1 (ANKRD1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16323 角蛋白18(KRT18)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Keratin 18 (KRT18) 48T/96T Mus musculus 鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒(Mouse)
16324 雌激素受體β(ERβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Estrogen Receptor Beta (ERb) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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