人繆勒管抑制物質/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人繆勒管抑制物質/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
37757 *標準品 Lithium Carbonate 300mg 554-13-2
37758 *標準品 Loperamide Hydrochloride 200mg 34552-83-5
37759 洛匹那韋標準品 Lopinavir 350mg 192725-17-0
37760 洛匹那韋系統適配物標準品 10mg
37761 氯碳頭孢標準品 Loracarbef 200mg 121961-22-6
37762 氯碳頭孢L-異構體標準品 Loracarbef L-Isomer 25mg
37763 *相關雜質C標準品 15mg 31251-41-9
37764 *標準品 Loratadine 200mg 79794-75-5
37765 *相關物質A標準品 15mg 100643-71-8
37766 *相關物質B標準品 15mg 38092-89-6
37767 *標準品 Lorazepam CIV 200mg 846-49-1
37768 *相關物質A標準品 Lorazepam Related Compound A 25mg 2848-96-6
37769 *相關物質B標準品 Lorazepam Related Compound B 25mg 2958-36-3
37770 *相關物質C標準品 Lorazepam Related Compound C 25mg 93955-15-8
37771 *相關物質D標準品 Lorazepam Related Compound D 25mg 54643-79-7
37772 *相關物質E標準品 Lorazepam Related Compound E 25mg 773871-49-1
37773 *標準品 Losartan Potassium 250mg 124750-99-8
37774 *標準品 Lovastatin 125mg 75330-75-5
37775 *相關物質A標準品 20mg 77517-29-4
37776 *標準品 Loxapine Succinate 125mg 27833-64-3
37777 洛沙平相關物質A標準品 Loxapine Related Compound A 20mg 3454-96-4
37778 苯芴醇標準品 Lumefantrine 100mg 82186-77-4
37779 苯芴醇相關物質A標準品 25mg
37780 葉黃素標準品 Lutein 1ml
37781 番茄紅素標準品 Lycopene 500mg
37782 利奈孕醇標準品 Lynestrenol 20mg 52-76-6
37783 L-賴氨酸醋酸鹽標準品 L-Lysine Acetate 200mg 57282-49-2
37784 L-賴氨酸鹽酸鹽標準品 L-Lysine Hydrochloride 200mg 657-27-2
37785 L-溶血*標準品 350mg 9008-30-4
37786 油酸聚烴氧酯標準品 Polyoxyl Oleate 500mg 9004-96-0
37787 聚氧乙烯硬脂酸酯標準品 Polyoxyl 10 Stearyl Ether 1g 9005-00-9
37788 醋酸*標準品 Mafenide Acetate 400mg 13009-99-9
37789 *標準品 Magaldrate 200mg 74978-16-8
37790 碳酸鎂標準品 Magnesium Carbonate (AS) 2g 546-93-0
37791 氯化鎂標準品 Magnesium Chloride (AS) 1g 7791-18-6
37792 *標準品 Magnesium Hydroxide (AS) 1g 1309-42-8
37793 磷酸鎂標準品 Magnesium Phosphate (AS) 2g 7757-87-1
37794 *標準品 Magnesium Salicylate 200mg 18917-95-8
37795 *標準品 Magnesium Stearate (AS) 5g 557-04-0
37796 馬拉硫磷標準品 Malathion 500mg 121-75-5
37797 馬來酸標準品 Maleic Acid 300mg 110-16-7
37798 蘋果酸標準品 Malic Acid 500mg 6915-15-7
37799 麥芽糖醇標準品 Maltitol 200mg 585-88-6
37800 麥芽酚標準品 Maltol 4g 118-71-8
37801 麥芽糖標準品 Maltose Monohydrate 500mg 6363-53-7
37802 扁桃酸標準品人繆勒管抑制物質/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA試劑盒 Mandelic Acid (AS) 500mg 90-64-2
37803 錳福地吡三鈉標準品 Mangafodipir Trisodium 200mg 140678-14-4
37804 錳福地吡相關物質A標準品 15mg
37805 錳福地吡相關物質B標準品 15mg
37806 錳福地吡相關物質C標準品 15mg
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人繆勒管抑制物質/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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