人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3(AFP-L3)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3(AFP-L3)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下，以期給客戶帶來一些啟發，提高試驗質量。

51046 C12ORF50  12號染色體開放閱讀框50抗體  0.2ml
51047 AQP3  水通道蛋白-3抗體  0.1ml
51048 C12ORF53  12號染色體開放閱讀框53抗體  0.2ml
51049 C12ORF54  12號染色體開放閱讀框54抗體  0.2ml
51050 phospho-AQP2(Ser269)  磷酸化水通道蛋白2抗體  0.1ml
51051 C12ORF61  12號染色體開放閱讀框61抗體  0.2ml
51052 C12ORF63  12號染色體開放閱讀框63抗體  0.2ml
51053 C12ORF68  12號染色體開放閱讀框68抗體  0.2ml
51054 CRCT1  富含半*C端蛋白1抗體  0.2ml
51055 CREG2  E1A激活基因刺激蛋白2抗體  0.2ml
51056 CWF19L1  CWF19L1蛋白抗體  0.2ml
51057 CWH43  細胞壁合成蛋白43抗體  0.2ml
51058 Cactin/C19orf29  19號染色體開放閱讀框29抗體  0.2ml
51059 MMAA/cblA  甲基丙二酸尿癥cblA抗體  0.2ml
51060 CREPT  腫瘤高表達細胞周期相關蛋白抗體  0.2ml
51061 LCA5L  致盲基因LCA5樣蛋白抗體  0.2ml
51062 LCA5  致盲基因LCA5蛋白抗體  0.2ml
51063 C21ORF56  21號染色體開放閱讀框56抗體  0.2ml
51064 C21ORF62  21號染色體開放閱讀框62抗體  0.2ml
51065 C21orf128  21號染色體開放閱讀框128抗體  0.2ml
51066 C21orf2  21號染色體開放閱讀框2抗體  0.2ml
51067 C21orf58  21號染色體開放閱讀框58抗體  0.2ml
51068 C21orf70  21號染色體開放閱讀框70抗體  0.2ml
51069 C21orf55/DnaJC28  21號染色體開放閱讀框55抗體  0.2ml
51070 C21orf55/DnaJC28  21號染色體開放閱讀框55抗體  0.2ml
51071 C21orf87  21號染色體開放閱讀框87抗體  0.2ml
51072 EURL/C21orf91  21號染色體開放閱讀框91抗體  0.2ml
51073 C22orf25  22號染色體開放閱讀框25抗體  0.2ml
51074 HSPC117/C22orf28  22號染色體開放閱讀框28抗體  0.2ml
51075 C22orf36  22號染色體開放閱讀框36抗體  0.2ml
51076 C22orf9  22號染色體開放閱讀框9抗體  0.2ml
51077 C2CD2/C21orf25  21號染色體開放閱讀框25抗體  0.2ml
51078 C2CD4C/NLF3  限局性核因子3抗體  0.2ml
51079 DGCR6L  無胸腺癥關鍵蛋白6樣抗體（迪格奧爾格綜合征）  0.2ml
51080 C4orf22  4號染色體開放閱讀框22抗體  0.2ml
51081 C4orf14  4號染色體開放閱讀框14抗體  0.2ml
51082 C4orf19  4號染色體開放閱讀框19抗體  0.2ml
51083 C4orf27  4號染色體開放閱讀框27抗體  0.2ml
51084 C4orf42  4號染色體開放閱讀框42抗體  0.2ml
51085 C4orf42  4號染色體開放閱讀框42抗體  0.2ml
51086 C4orf33  4號染色體開放閱讀框33抗體  0.2ml
51087 C4orf44  4號染色體開放閱讀框44抗體  0.2ml
51088 C5ORF33  5號染色體開放閱讀框33抗體  0.2ml
51089 Kappa-casein/CSN3  κ-酪蛋白抗體  0.2ml
51090 Beta-casein  β-酪蛋白抗體  0.2ml
51091 Alpha s1 Casein  α-s1酪蛋白抗體  0.2ml
51092 Alpha s2 Casein  α-s2酪蛋白抗體  0.2ml
51093 DRAM  DNA損傷自噬調整蛋白抗體  0.2ml
51094 AQP4  水通道蛋白-4抗體  0.1ml
51095 AQP5  水通道蛋白5抗體  0.1ml
51096 AQP7  人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3(AFP-L3)ELISA試劑盒水通道蛋白-7抗體  0.1ml
51097 ABAT  γ氨基丁酸轉氨酶抗體  0.2ml
51098 AQP9  水通道蛋白-9抗體  0.1ml
51099 Androgen receptor  雄激素受體抗體  0.1ml
51100 Chondroitin Sulfate  *抗體  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質量優良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。 
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3(AFP-L3)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質量。
在實際操作中，除了選擇優良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內質控、室間質評，以嚴謹的工作作風檢測每一份標本，才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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