人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下，以期給客戶帶來一些啟發，提高試驗質量。

51104 phospho-Androgen Receptor (Ser212)  磷酸化雄激素受體抗體  0.1ml
51105 Amphiregulin  雙調蛋白（結腸直腸細胞源性生長因子）抗體  0.1ml
51106 AKR1B1  醛糖還原酶抗體  0.2ml
51107 ARA24  雄激素受體相關蛋白24抗體  0.2ml
51108 phospho-Androgen Receptor(Ser660)  磷酸化雄激素受體抗體  0.1ml
51109 ARC/Arg3.1  ARC抗體  0.1ml
51110 ARF6  ADP核糖基化因子6抗體  0.2ml
51111 Arfaptin 1  ADP核糖基化因子結合蛋白1抗體  0.1ml
51112 mSin3A  同源轉錄調節蛋白Sin3A抗體  0.2ml
51113 Arfaptin 2  ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體  0.2ml
51114 phospho-arfaptin 2(Ser260)  磷酸化ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體  0.1ml
51115 Arhgef2/GEF H1  Rho鳥苷酸交換因子2抗體  0.2ml
51116 phospho-Arhgef2(Ser810)  磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗體  0.1ml
51117 Aromatase  芳香化酶抗體  0.1ml
51118 Aromatase  芳香化酶/細胞色素P450/雌激素合成酶抗體  0.1ml
51119 COX1/MTCO1  *氧化酶1抗體  0.2ml
51120 COX7A2  *氧化酶7A2抗體  0.1ml
51121 COX3  *氧化酶亞基3抗體  0.2ml
51122 COX7A2  *氧化酶COX7A2抗體  0.1ml
51123 COX6B  *氧化酶亞基6B抗體  0.2ml
51124 Activin A Receptor Type IB  激活素受體1B抗體  0.2ml
51125 ARIP2a  激活素受體2A抗體  0.2ml
51126 Beta-arrestin 1  β-抑制蛋白1抗體  0.2ml
51127 Phospho-beta-Arrestin 1(Ser412)  磷酸化β抑制蛋白1抗體  0.1ml
51128 β-arrestin/ARRB2  β-抑制蛋白2抗體/β休止蛋白2抗體  0.1ml
51129 ARIP2B  激活素受體2B抗體  0.2ml
51130 ARP4  肝血管生成素相關蛋白抗體  0.1ml
51131 ARSA  芳基硫酸酯酶A抗體  0.2ml
51132 Artemin  Artemin抗體  0.2ml
51133 ADRA1/ADRA1B/alpha 1 Adrenergic Receptor  alpha 1腎上腺素能受體抗體  0.1ml
51134 FAM61B/LSM14B  FAM61B蛋白抗體  0.2ml
51135 ESYT1/FAM62A  延伸突觸蛋白1抗體  0.2ml
51136 ESYT2/FAM62B  延伸突觸蛋白2抗體  0.2ml
51137 FAM63A  FAM63A蛋白抗體  0.2ml
51138 RCS1/FAM64A  染色體分離調節蛋白1抗體  0.2ml
51139 FAM70A  FAM70A蛋白抗體  0.2ml
51140 FAM71A  FAM71A蛋白抗體  0.2ml
51141 FAM71A  FAM71A蛋白抗體  0.2ml
51142 FAM83F  FAM83F蛋白抗體  0.2ml
51143 NSE1/FAM84A  感覺神經蛋白1抗體  0.2ml
51144 FAM92A1  FAM92A1蛋白抗體  0.2ml
51145 FAM98A  FAM98A蛋白抗體  0.2ml
51146 ILDR1  免疫球蛋白樣結構域受體1抗體  0.2ml
51147 ILVBL  乙酰乳酸合成酶蛋白抗體  0.2ml
51148 BFSP2/Phakinin  晶狀體蛋白2抗體  0.2ml
51149 GFAP delta  膠質纖維酸性蛋白GFAPδ抗體  0.2ml
51150 NPTX2  神經細胞穿透素2抗體  0.2ml
51151 CD276/B7H3  CD276抗體  0.2ml
51152 CRIPT  突觸后蛋白CRIPT抗體  0.2ml
51153 DNAH10  軸絲動力蛋白10抗體  0.2ml
51154 DNAH7  軸絲動力蛋白7抗體  0.2ml
51155 DNAI1/Dynein intermediate chain 1  軸絲中鏈動力蛋白抗體  0.2ml
51156 Gigaxonin  巨軸索神經病蛋白GAN抗體  0.2ml
51157 Kinesin 人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)ELISA試劑盒 驅動蛋白KNS1抗體  0.2ml
51158 KIF5A/NKHC1  驅動蛋白KIF5A抗體  0.2ml
51159 MAP1B  微管相關蛋白1B抗體  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質量優良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。 
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質量。
在實際操作中，除了選擇優良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內質控、室間質評，以嚴謹的工作作風檢測每一份標本，才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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