人腫瘤壞死因子β(TNFβ)elisa檢測(cè)試劑盒 ，英文名：Human Tumor necrosis factor β，TNFβ ELISA Kit
產(chǎn)品簡(jiǎn)單說(shuō)明：Tumor necrosis factor β，TNFβ，腫瘤壞死因子β。腫瘤壞死因子根據(jù)其產(chǎn)生來(lái)源和結(jié)構(gòu)不同，可分為TNF-α和TNF-β兩類。1985年Shalaby把巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的TNF命名為TNF-α，把T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的淋巴毒素(lymphotoxin,LT)命名為TNF-β。TNF-β是一種淋巴因子，抗原和絲裂原均可刺激T淋巴細(xì)胞分泌TNF-β。PMA刺激RPMI1788B淋巴母細(xì)胞可分泌高水平TNF-β。TNF-α與TNF-β的生物學(xué)作用極為相似，這可能與分子結(jié)構(gòu)的相似性和受體的同一性有關(guān)。但在某些生物學(xué)作用方面也有不同之處。TNF-α和β發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)的天然形式是同源的三聚體。

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ELISA的比色測(cè)定由酶標(biāo)儀進(jìn)行。有的同行可能會(huì)認(rèn)為，既然由酶標(biāo)儀進(jìn)行，那么此時(shí)便可以萬(wàn)事大吉了，其實(shí)不然，因?yàn)楫?dāng)代較為先進(jìn)的酶標(biāo)儀，均有較多的功能，使用不當(dāng)，會(huì)得到令人難以理解的人腫瘤壞死因子β(TNFβ)elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如使用酶標(biāo)儀比色測(cè)定后，有許多的陰性測(cè)定孑L的吸光度值為負(fù)數(shù)；或測(cè)定假陽(yáng)性率大大增加等等。這主要是沒(méi)有正確地理解和使用酶標(biāo)儀所致。
此外，在加入底物開(kāi)始顯色反應(yīng)前，是先檢查一下底物溶液的有效性，即可將A和B兩種液各加1滴于清潔的空板孔或eppendorf管中，觀察是否有顯色出現(xiàn)，如有，則說(shuō)明底物已變質(zhì)。以O(shè)PD為底物，配好后應(yīng)為五色，否則就不能使用。以TMB為底物，整個(gè)顯色反應(yīng)過(guò)程無(wú)需避光，而以O(shè)PD為底物，則需避光進(jìn)行。關(guān)于TMB和OPD的顯色反應(yīng)特點(diǎn)及注意點(diǎn)可參考前面有關(guān)章節(jié)內(nèi)容。顯色反應(yīng)完成后，加入酸終止反應(yīng)，振蕩混勻后即可進(jìn)行下面的比色測(cè)定或肉眼判斷結(jié)果。

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在目前的以HRP作為標(biāo)記酶的商品市場(chǎng)ELISA試劑盒中，如以TMB為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以O(shè)PD為底物，則試劑盒提供OPD片劑或粉劑，臨用前配制。一般商品人腫瘤壞死因子β(TNFβ)elisa檢測(cè)試劑盒顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15～30min。從理論上說(shuō)，37℃30min才可以使HRP的底物催化反應(yīng)*，盡管在zui初的10min內(nèi)，絕大部分催化反應(yīng)即可完成。因此，為使弱陽(yáng)性樣本孔能有充分的顯色，建議在37℃下反應(yīng)25～30min后，終止反應(yīng)比色測(cè)定。