MAG Ab人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體ELISA試劑盒
大鼠細(xì)胞周期素D3ELISA檢測(cè)Cyclin-D3 Human coagulation factor Ⅸ,FⅨ ELISA
大鼠細(xì)胞周期素D2ELISA檢測(cè)Cyclin-D2 Human coagulation factor Ⅹ,FⅩ ELISA
大鼠細(xì)胞周期素D1ELISA檢測(cè)Cyclin-D1 Human von Willebrand Factor,vWF ELISA
大鼠髓磷脂堿性蛋白ELISA檢測(cè)MBP Human plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA
MAG Ab人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體ELISA試劑盒 途:
用GsaR人促胃液素受體ELISA試劑盒的含量。
大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白ELISA檢測(cè)AFP Human thrombin-antithrombin complex,TAT ELISA
大鼠前列腺酸性磷酸酶ELISA檢測(cè)PAP Human anti-thrombin receptor,ATR ELISA
大鼠游離前列腺特異性抗原ELISA檢測(cè)fPSA Human thrombin receptor,TR ELISA
PSA大鼠前列腺特異性抗原ELISA檢測(cè) Human Factor Ⅷ-related Antigen,FⅧAg ELISA
大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA檢測(cè) Human Fibrinogen,Fbg ELISA
大鼠乳腺癌標(biāo)志物-CA153ELISA檢測(cè) Human major histocompatibility complex Ⅰ,MHCⅠ/HLAⅠ ELISA
大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA檢測(cè) Human Anti-Thrombin Ⅲ,AT-Ⅲ ELISA
大鼠血紅素氧合酶1ELISA檢測(cè)HO-1 Human thrombus precursor protein,TpP ELISA
大鼠磷脂酶A2ELISA檢測(cè)PL-A2 Human lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA
步驟一
雙抗體夾心法
1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱(chēng)洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。
然而,影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。