細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備F-12K培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
中文名稱:FGFR抑制劑(NVP-BGJ398)
英文名稱:NVP-BGJ398
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
產品貨號:BJ-01X7151
英文名稱:NVP-BGJ398 產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg NVP-BGJ398是一種有效的FGFR抑制劑,抑制FGFR1,FGFR2,FGFR3和FGFR4,IC50分別為0.9nM,1.4nM,1nM和60nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! :872511-34-7 別名:Infigratinib;BGJ-398 純度:99.88% 分子量:560.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
Bacillus licheniformis地衣形芽孢桿LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 1-2周TNFSF13/CD256/APRIL 瘤壞死因子配體超家族成員13抗體 規格: 0.2ml
Streptococcus mutans變異鏈球探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周RNF44 環指蛋白44抗體 規格: 0.2ml
Radix aconiti preparata制川烏染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周APOA2 載脂蛋白A2抗體 規格: 0.1ml
O'nyong-nyong Virus(ONNV)阿尼昂-尼昂病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周PRUNE/DRES17 相關蛋白DRES17抗體 規格: 0.2ml
Venezuelan Equine Encephalomyelitis Virus(VEEV)委內瑞拉馬腦脊髓炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗小鼠IgG-Fc 規格: 0.1ml
Radix astragali黃芪LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周KIAA1576/VAT1L 囊泡胺轉運蛋白1家族蛋白抗體 規格: 0.2ml
Proteus mirabilis變異變形桿LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周SEI2/SERTAD2 調控周期蛋白依賴蛋白激SEI2抗體 規格: 0.2ml
Coccidioides immitis粗球孢子探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周DDB2 DNA損傷結合蛋白2抗體 規格: 0.1ml
Fructus forsythiae連翅LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周RBPJK/RBP-J Notch轉錄調控蛋白RBPJK抗體 0.2ml
Mycobacterium xenopi蟾分枝桿LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周CRP C-反應蛋白抗體 規格: 0.1ml
FGFR抑制劑(NVP-BGJ398)人低密度脂蛋白受體相關蛋白1(LRP-1)免疫試劑盒進口、分裝
麥芽糖發酵管 英文名稱: 產品規格:20支
人N-乙酰-β-D-糖苷(NAG)免疫試劑盒現貨供應
豬谷合成(GS)免疫試劑盒現貨供應
犬B-淋巴細胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)免疫試劑盒進口、組裝
小鼠破傷風(Tetanus)抗體免疫試劑盒進口、組裝
雞熱休克蛋白60(Hsp-60)免疫試劑盒現貨供應
小鼠白介素10(IL-10)免疫試劑盒進口、分裝
大鼠血管緊張素1-7(Ang1-7)免疫試劑盒進口、分裝
兔子Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)免疫試劑盒進口、組裝
大鼠基質金屬蛋白3(MMP-3)免疫試劑盒現貨供應