中文名稱：EGFR抑制劑（AV-412 free base）
英文名稱：AV-412 free base
產品規格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
產品貨號：BJ-01X8313
AV-412(MP412)是EGFR抑制劑，抑制EGFR，EGFRL858R，EGFRT790M，EGFRL858R/T790M和ErbB2的IC50值分別為0.75，0.5，0.79，2.3，19nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ ：451492-95-8 別名：MP-412 free base 純度：98.49% 分子量：507.0 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1） 準備F-12K培養基；優質胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
二． 細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
小鼠 OPCML 基因全長ORF克隆雞神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)免疫試劑盒*直銷
小鼠 EGFR 基因全長ORF克隆雞神經調節蛋白1(NRG1)免疫試劑盒進口、組裝
小鼠 CD34 基因全長ORF克隆雞三碘甲狀腺原(T3)免疫試劑盒進口、分裝
小鼠 ICOS 基因全長ORF克隆雞溶菌(LZM)免疫試劑盒現貨供應
小鼠 IL36B / IL1F8 基因全長ORF克隆雞熱休克蛋白90(HSP-90)免疫試劑盒*直銷
小鼠 IL31 基因全長ORF克隆雞熱休克蛋白72(HSP-72)免疫試劑盒進口、組裝
小鼠 RIPK3 基因全長ORF克隆雞熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒進口、分裝
小鼠 IL5 基因全長ORF克隆雞熱休克蛋白60(Hsp-60)免疫試劑盒現貨供應
小鼠 IL24 基因全長ORF克隆雞熱休克蛋白40(HSP-40)免疫試劑盒*直銷
小鼠 IL17A 基因全長ORF克隆雞熱休克蛋白27(HSP-27)免疫試劑盒進口、組裝
小鼠 TUBB3 基因全長ORF克隆雞熱休克蛋白20(HSP-20)免疫試劑盒進口、分裝
EGFR抑制劑（AV-412 free base）土壤酸性磷酸酶(S-ACP)測試盒(可見分光光度法) 50管/48樣 大腸桿菌/大腸菌群液體顯色培養基 E.Coli/Coliform Broth Chromogenic Medium 1000ml
土壤中性磷酸酶(S-NP)測試盒(微量法) 100管/96樣 1 管 Novablue(DE3)大腸桿菌 Novablue(DE3) E.coli Strain -80℃保存
土壤中性磷酸酶(S-NP)測試盒(可見分光光度法) 50管/48樣 2 ug pRNATin-H1.2/Retro pRNATin-H1.2/Retro 低溫運輸，-20℃保存
土壤堿性磷酸酶(S-AKP/ALP)測試盒(微量法) 100管/96樣 50次 柱式血液RNAout Column Blood RNAOUT 4℃保存
土壤堿性磷酸酶(S-AKP/ALP)測試盒(可見分光光度法) 50管/48樣 2 ug pcDNA4/HisMax B pcDNA4/HisMax B 低溫運輸，-20℃保存
土壤脫氫酶(SDHA)測試盒(微量法) 100管/48樣 麥芽提取物瓊脂培養基 250g
土壤脫氫酶(SDHA)測試盒(可見分光光度法) 50管/24樣 5g α －萘乙酸 NAA (α-Naphthalene Acetic Acid) 室溫保存
土壤過氧化物酶(S-POD)測試盒(微量法) 100管/96樣 50T 牛錐蟲PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
土壤木質素過氧化物酶(S-LiP)測試盒(微量法) 100管/48樣 10 mg Dihydrorhodamine 123 Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
土壤錳過氧化物酶(S-Mnp)測試盒(微量法) 100管/48樣 50T 雞特定基因序列PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
土壤錳過氧化物酶(S-Mnp)測試盒(可見分光光度法) 50管/24樣 100次 低載量PCR片段純化試劑盒 Mini PCR Clean-Up Kit 常溫保存
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
