培養操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產品參數：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 產品貨號 |
JAK2抑制劑（NVP-BSK805 dihydrochloride） | NVP-BSK805 dihydrochloride | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | BJ-01X8070 |
商品詳細介紹：
NVP-BSK805雙鹽酸鹽(BSK805)是ATP競爭性JAK2抑制劑，IC50為0.5nM，比對JAK1，JAK3和TYK2的抑制性高超出20倍。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ 別名：BSK805 dihydrochloride 純度：98.0% 分子量：563.47 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
人 AGA 基因全長ORF克隆人唾液過氧化物(SP)免疫試劑盒*直銷
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JAK2抑制劑（NVP-BSK805 dihydrochloride）非核苷抑制劑(ABT-333) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg ABT-3331%亞碲酸鉀溶液 5ml*10
HIV-1蛋白酶抑制劑(Tipranavir) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg Tipranavir1瓶 LII細胞株 LII 低溫運輸和保存
NRTI和HIV-1抑制劑（Emtricitabine） 1mL(10mM)|50mg|100mg|200mg|500mg EmtricitabinePBS-Tween20洗液 PBS-Tween20 lotion 250g
RSV融合抑制劑(Presatovir) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Presatovir100mg 膠原Ⅲ型 Collagenase Type Ⅲ 4℃保存
皰疹家族病毒抑制劑(Ganciclovir) 1mL(10mM)|100mg|1g|5g Ganciclovir250mL Succinate Buffer（琥珀酸緩沖液）,0.2M,pH4.5 Succinate Buffer,0.2M,pH4.5 常溫保存
HIV蛋白酶抑制劑(Ritonavir) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|500mg Ritonavir50次 液體樣品蛋白純化回收試劑盒 Liquid Sample Protein Purification Kit 常溫保存
HCV NS3protease抑制劑（Boceprevir） 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Boceprevir2 ug psiRNA-hH1-neo psiRNA-hH1-neo 低溫運輸，-20℃保存
核苷酸逆轉錄酶抑制劑（Tenofovir Disoproxil Fumarate） 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg Tenofovir Disoproxil Fumarate50gsu 人重組TFIIB rhTFIIB 4℃保存
革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌抑制劑(Tebipenem) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg Tebipenem2 ug pDNR1 pDNR1 低溫運輸，-20℃保存
neuraminidase抑制劑（Oseltamivir phosphate） 1mL(10mM)|100mg|500mg Oseltamivir phosphate改良CCD瓊脂添加劑 CCD Agar Additive 1ml*5
RNA聚合酶抑制劑(Rifampicin) 1mL(10mM)|1g|5g Rifampicin25g 豬膽鹽 Pig Bile Salts 室溫保存
