操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:瑞氏染色液(Wright stain)
英文名稱:
產品規格:2×100ml|2×500ml
產品貨號:BJ-01X6896
用途: 適用于細胞涂片、細菌等染色 注意事項: 主要由瑞氏染色液、磷酸鹽緩沖液組成,細胞質呈紅色,細胞核及細菌呈藍色,嗜酸性顆粒呈橘紅色。 儲存條件:室溫,24個月 |
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備F-12K培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
Rotavirus 輪狀病毒通用探針法熒光定量RT-PCR試劑盒(停) 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗體 規格: 0.1ml
Influenza Virus A甲型流感()病毒H10N8亞型RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用) 50次 低溫 負20度 一年 2-4周CYP5A1/Thromboxane synthase 栓素合成抗體 規格: 0.2ml
水牛源性成分LAMP試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Bio 標記的兔抗小鼠IgG-Fc 規格: 0.1ml
Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome Virus(HFRSV)腎綜合癥出血熱病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周CAP1/PARK7 CAP1抗體 規格: 0.2ml
Potato Yellow Dwarf Virus(PYDV)馬鈴薯黃矮病毒RT-PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Rabbit Anti-dog IgG/RBITC 羅丹明標記的兔抗狗IgG 規格: 0.3ml
Flos chrysanthemi菊花PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周SELS 癥負調控因子蛋白抗體 規格: 0.1ml
Avian Leukosis Virus(ALV)禽白血病病毒C亞群RT-LAMP試劑盒,停 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Mouse Anti-human IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標記的小鼠抗人IgM 規格: 0.1ml
Streptococcus Suis Type 2 豬鏈球2型探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phosphos-PCNA (Tyr211) 磷酸化增細胞核抗原抗體 規格: 0.1ml
Polyporus豬苓染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周CA6 碳酸酐6抗體 規格: 0.2ml
Pasteurella spp.巴斯德氏桿屬通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 1-2周AU1 tag AU1 tag標簽抗體 規格: 0.1ml
瑞氏染色液(Wright stain)雙抗巧克力瓊脂 英文名稱:Double anti-chocolate agar 產品規格:250g
人補體3裂解產物(C3SP)免疫試劑盒進口、組裝
落新婦苷 : 29838-67-3 規格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
人B淋巴細胞抗原(CD20)免疫試劑盒進口、分裝
小鼠整合素α5(Itgax/CD11c)免疫試劑盒現貨供應
牛胱天蛋白8(Casp-8)免疫試劑盒進口、組裝
小鼠巨噬細胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)免疫試劑盒*直銷
猴子腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體3(TRAIL-R3)免疫試劑盒現貨供應
小鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)免疫試劑盒進口、組裝
大鼠腎上腺髓質素(ADM)免疫試劑盒進口、組裝
山羊三碘甲狀腺原(T3)免疫試劑盒進口、組裝