"甘露醇鹽瓊脂培養(yǎng)基
美國(guó)藥典培養(yǎng)基(USP標(biāo)準(zhǔn))
250g
用于金黃色葡萄球菌選擇性分離培養(yǎng)
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相關(guān)知識(shí)>>>>>
多克隆抗體的制備一般包括以下幾個(gè)步驟:
1、制備抗原。
2、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。
3、動(dòng)物免疫。
4、試取血進(jìn)行測(cè)試,看看是否成功免疫。
5、如果成功免疫,殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
抗體的效價(jià)鑒定:
不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定。
zui初有人用電泳證明血清中抗體活性在γ球蛋白部分,故曾把抗體統(tǒng)稱為丙種(γ)球蛋白。后來(lái)發(fā)現(xiàn),抗體并不都在γ區(qū);并且位于γ區(qū)的球蛋白,也不一定都具有抗體活性。
1964年,世界衛(wèi)生組織舉行專門會(huì)議,將具有抗體活性以及與抗體相關(guān)的球蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白(Ig),如骨髓瘤蛋白,巨球蛋白血癥、冷球蛋白血癥等患者血清中存在的異常免疫球蛋白以及正常人天然存在的免疫球蛋白亞單位等。因而免疫球蛋白是結(jié)構(gòu)化學(xué)的概念,而抗體是生物學(xué)功能的概念??梢哉f(shuō),幾乎所有抗體都是免疫球蛋白(極少數(shù)抗體為RNA),但并非所有免疫球蛋白都是抗體。
按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能分類:
按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能,可將其分為IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五類。
IgM抗體是免疫應(yīng)答中首先分泌的抗體。它們?cè)谂c抗原結(jié)合后啟動(dòng)補(bǔ)體的級(jí)聯(lián)反應(yīng)。它們還把入侵者相互連接起來(lái),聚成一堆便于巨噬細(xì)胞的吞噬;
IgG抗體激活補(bǔ)體,中和多種毒素。IgG持續(xù)的時(shí)間長(zhǎng),是*能在母親妊娠期穿過(guò)胎盤保護(hù)胎兒的抗體。他們還從乳腺分泌進(jìn)入初乳,使新生兒得到保護(hù);
IgA抗體進(jìn)入身體的黏膜表面,包括呼吸、消化、生殖等管道的黏膜,中和感染因子。還可以通過(guò)母乳的初乳把這種抗體輸送到新生兒的消化道黏膜中,是在母乳中含量zui多,zui為重要的一類抗體;
IgE抗體的尾部與嗜堿細(xì)胞、肥大細(xì)胞的細(xì)胞膜結(jié)合。當(dāng)抗體與抗原結(jié)合后,嗜堿細(xì)胞與肥大細(xì)胞釋放組織胺一類物質(zhì)促進(jìn)炎癥的發(fā)展。這也是引發(fā)速發(fā)型過(guò)敏反應(yīng)的抗體;
IgD抗體的作用還不太清楚。它們主要出現(xiàn)在成熟的B淋巴細(xì)胞表面上,可能與B細(xì)胞的分化有關(guān)。
(IgD于1995年從人骨髓瘤蛋白中發(fā)現(xiàn),分子量為175kD,主要由扁桃體、脾等處漿細(xì)胞產(chǎn)生,人血清中IgD濃度為3~40μg/ml,不到血清總Ig的1%,在個(gè)體發(fā)育中合成較晚。IgD鉸鏈區(qū)很長(zhǎng),且對(duì)蛋白酶水解敏感,因此IgD半衰期很短,僅2.8天。血清中IgD確切的免疫功能尚不清楚。在B細(xì)胞分化到成熟B細(xì)胞階段,除了表達(dá)SmIgD,抗原刺激后表現(xiàn)為免疫耐受。成熟B細(xì)胞活化后或者活化后或者變成記憶B細(xì)胞時(shí),SmIgD逐漸消失。)
抗體的特異性鑒定 :
抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力??贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在 IC50時(shí)的濃度,并按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為 0,即該血清的特異性較好。
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甘露醇鹽瓊脂培養(yǎng)基
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