Anti-p-Nitrophenyl Phosphate Disodium,pNPP對硝基苯磷酸二鈉
規 格 0.1ml/0.2ml
濃 度 1mg/1ml
性 狀 Lyophilized or Liquid
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
Anti-p-Nitrophenyl Phosphate Disodium,pNPP對硝基苯磷酸二鈉來源 單抗/Mouse,多抗/Rabbit來源一抗
克隆類型 Monoclonal
交叉反應 Hum,Mouse, Rat, Rabbit, pig(更多詳情咨詢客服)
產品應用 WB=1:100-1000 ELISA=1:1000-5000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100- 500 IF=1:100-500 (石蠟切片需做抗原修復)
保存條件 Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -2℃ . When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4℃.
免疫組化實驗是利用抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究。免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個B淋巴細胞克隆分泌的抗體,應用細胞融合雜交瘤技術免疫動物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動物后,從動物血中所獲得的免疫血清,是多個B淋巴細胞克隆所產生的抗體混合物。
顯色反應(注:二抗一般有兩種常用標記酶,HRP和AP,其相對應的顯色底物試劑盒為DAB和BCIP/NBT,裂解液一般用發光法。)HRP標記二抗顯色, 用DAB KIT(KPL LOT NO YM107 CAT:54-10-00)顯色,按順序依次加Tris Buffer 3滴,DAB Substrate 3滴,Peroxide solution 2滴于5ml蒸餾水中,避光,混勻,將膜加入顯色液中避光顯色15 min左右終止反應,記錄實驗結果,將NC膜晾干掃描保存。AKP標記二抗顯色,用AKP緩沖液洗膜5min,棄去AP緩沖液,加入顯色液(66µlNBT溶液同10mlAKP緩沖液充分混合均勻后加入33µl BCIP溶液1h內使用),室溫下顯色(37℃可加速反應),顯色反應通常在30min內可完成。用20mM EDTA/TBS洗膜終止反應,記錄實驗結果,將NC膜晾干掃描保存。反應溶液可預先配置,可在4℃儲存一年以上。
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