細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
大鼠棕色脂肪干分離自棕色脂肪組織;動物體內存在棕色和白色兩種脂肪,白色脂肪堆積在皮下,負責儲存多余熱量;棕色脂肪負責分解引發肥胖的白色脂肪,將后者轉化成二氧化碳、水和熱量,本身不儲存熱量。棕色脂肪組織呈棕色,其特點是組織中有豐富的毛細血管,脂肪細胞內散著許多小脂滴,線粒體大而豐富,核圓形,位于細胞中央,這種脂肪細胞也稱為多泡脂肪細胞。棕色脂肪組織在成年動物極少,新生兒及冬眠動物較多,在新生兒主要分布在肩胛間區、腋窩及頸后部等處。棕色脂肪組織僅在嬰兒時期發揮作用,它們堆積在新生兒肩胛處,幫助維持體溫。隨著年齡增長,棕色脂肪會逐漸消失。終,動物體內只殘存少量棕色脂肪細胞,分布于頸部和鎖骨。脂肪干細胞(ADSCs)是一種具有多向分化潛能的干細胞,主要恢復組織細胞的修復功能,促進細胞的再生,恢復年輕面容的同時,身體機能也得到充分改善,有效改善亞健康、早衰等疾病,由內而外真正的有效抵抗衰老。脂肪干細胞具有很多優點:①具有自我更新及多向分化的潛能;②來源充足;③對供區的創傷較小;④獲得率及體外擴增速率高。脂肪干細胞是目前被廣泛應用于組織工程領域中理想的種子細胞。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠棕色脂肪干采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠棕色脂肪干經CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 脂肪組織 | 產品貨號 | YS-01X7665 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠甘肽/甘素(GAL)試劑盒 ,英文名: GAL ELISA Kit
Porcine thyroopin releasing hormone (H) ELISA Kit 豬促甲狀腺素釋放激素(H)試劑盒
轉基因植物NOS基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMCP-4/CCL13(Humanmonocytechemotacticprotein4)ELISAkit人單核細胞趨化蛋白4
體液唾液酸(SA)比色法定量試劑盒50次
ELISAKitIL-1β綿羊白介素1β
血栓素A2 英文名稱: Human Thromboxane A2 英文縮寫: TXA2
血栓素B2 英文名稱: Human Thromboxane B2 英文縮寫: TXB2
血栓素B2 英文名稱: Human Thromboxanes B2 英文縮寫: TXB2
甲狀腺球蛋白抗體 英文名稱: Human Thyroglobulin Aibody 英文縮寫: TGAb
FLJ37424蛋白抗體
小鼠脂肪甘油三酯酯酶(ATGL)試劑盒 96T/48T
Human ai hepatitis B virus core aibody IgM (HBcAb-IgM) ELISA Kit 人抗乙型肝病毒核心IgM抗體(HBcAb-IgM)試劑盒
Humanneuophilicalkalinephosphatase,NAPELISAKit 人中性粒細胞堿性0酸酶(NAP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforAACT(HumanAlpha1Aichymoypsin)ELISAKit人α1抗胰
抗原修復溶液50毫升
MouseNeuroophin3,-3ELISAKit小鼠神經營養因子3(-3)試劑盒規格:96T/48T
Bruton酪激酶抑制劑蛋白抗體
EPHA4重組小鼠 EphA4 / HEK8 蛋白 Protein
Apelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原 0.5mgApelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原
MFGE8重組人 MFG-E8 / lactadherin / MFGE8 蛋白 Protein
CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113, His 標簽)
CD70 Protein Rat 重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 標簽)
大鼠棕色脂肪干細胞白介素2(IL2)重組蛋白 Recombinant Interleukin 2 (IL2)
CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113, His 標簽)
XCL1重組小鼠 XCL1 蛋白 Protein
IL2RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL2RA 蛋白
CKB重組人 CKB / Creatine kinase B type 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。