細胞名稱 羊駝肌肉來源細胞
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雄性羊駝的骨骼肌組織。由中科院昆明細胞庫于2015年建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶 無
染色體
產(chǎn)品圖片:
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉湯基礎(chǔ) 規(guī)格: 100g 作用: 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(參考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名稱: CD36
肉浸液肉湯 規(guī)格: 250g 作用: 用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn)) 英文名稱: KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規(guī)格: 250g 作用: 用于溶血性鏈球菌及其它營養(yǎng)要求較高的細菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名稱: CD97
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 作用: 用于營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)及溶血試驗,還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱: NTRK3
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格: 250g 作用: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養(yǎng)基,用于營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)及溶血試驗(GB 4789.10-... 英文名稱: HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 作用: 可廣泛應(yīng)用于細菌的培養(yǎng),特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟... 英文名稱: HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格: 2x5支 作用: 試劑A和試劑B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名稱: SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規(guī)格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱: IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規(guī)格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名稱: IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規(guī)格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名稱: PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規(guī)格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名稱: TNF
0403
0.5g 苦木 TLC法鑒別 121017-
1g 苦玄參 TLC法鑒別 121018-200503
1.0g 苦參 TLC法鑒別 121019-200705
2g 羅漢果 TLC法鑒別 121020-200804
1.0g 萎陵菜 TLC法鑒別 121021-200002
20mg 珍珠(皺紋冠蚌) TLC法鑒別 121022-200403
1.0g 蓽茇 TLC法鑒別 121023-200202
1g 牽牛子 TLC法鑒別 121024-200804
1.0g 香加皮 TLC法鑒別 121025-200503
1.0g *味 TLC法鑒別 121026-201005
1.0g 穿山甲 TLC法鑒別 121027-200403
1.0g 桔梗 TLC法鑒別 121028-200909
1g 益智 TLC法鑒別 121029-200503
0.5g 蛇床子 TLC法鑒別 121030-200405
0.4g 鹿茸(梅花鹿) TLC法鑒別 121031-201003
0.2g 羊藿(朝鮮羊藿) TLC法鑒別 121032-200501
3.0g 續(xù)斷(川續(xù)斷) TLC法鑒別 121033-200909
1.0g 綿馬貫眾 TLC法鑒別 121034-200302
5.0g 滿山紅(興安杜鵑) TLC法鑒別 121035-200204
1.0g 漏蘆(祁州漏蘆) TLC法鑒別 121036-200302
1g 獐牙菜 TLC法鑒別 12103
Anti-AT1/FITC 熒光素標(biāo)記血管緊張素I抗體IgG
Anti-AT1R/FITC 熒光素標(biāo)記血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體IgG
A、大、小鼠失調(diào)癥蛋白1抗體IgG
Anti-Ataxin-1(phospho Ser776)/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體IgG
Anti-AU5 tag/FITC 熒光素標(biāo)記AU5 tag標(biāo)簽抗體IgG
Anti-AU1 tag/FITC 熒光素標(biāo)記抗AU1 tag標(biāo)簽抗體IgG
Anti-Aurora A /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、牛、兔、馬、豬有絲分裂激酶A抗體IgG
Anti-Phospho-Aurora A (p-Thr288) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化有絲分裂激酶A抗體IgG
Anti-Aurora B/FITC 熒光素標(biāo)記極光激酶B抗體IgG
Anti-Phospho-Aurora B (Thr232)/Aurora C (Thr198) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化有絲分裂激酶B/C抗體IgG
Anti-Aurora A/Aurora B/Aurora C /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠有絲分裂激酶A、B、C抗體IgG
Anti-Aurora C /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、牛、兔、豬有絲分裂激酶B抗體IgG
Anti-AVEN/FITC 熒光素標(biāo)記凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑抗體IgG
Anti-AVPR2/FITC 熒光素標(biāo)記精氨酸加壓素受體2抗體IgG
Anti-Axin1/FITC 熒光素標(biāo)記軸蛋白1Axin protein 1抗體IgG
Anti-B7-DC/PDL2/CD273 /FITC 熒光素標(biāo)記程序性死亡配體2抗體IgG
Anti-B7-H1/PDL1/CD274 /FITC 熒光素標(biāo)記程序性死亡配體1抗體IgG
Anti-B7-H4/FITC 熒光素標(biāo)記B7H4抗體IgG
Anti-BACE/ASP2 /FITC 熒光素標(biāo)記β分泌酶抗體IgG
Anti-Bad/FITC 熒光素標(biāo)記相關(guān)死亡促進因子Bad抗體IgG
Anti-Bad/FITC 熒光素標(biāo)記相關(guān)死亡促進因子Bad抗體IgG
Anti-Phospho-Bad(Ser112) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化相關(guān)死亡促進因子抗體IgG
Anti-p-BAD/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化相關(guān)死亡促進因子p-BAD抗體IgG
羊駝肌肉來源細胞Anti-BAD(phospho Ser75,Ser99,Ser118) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化相關(guān)死亡促進因子抗體IgG
Anti-Phospho-Bad(Ser136) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化相關(guān)死亡促進因子抗體IgG
Anti-Phospho-Bad(Ser155) /FITC 熒光素標(biāo)
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富,可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃,225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時,30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率,若轉(zhuǎn)化control pUC19計算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。