細胞名稱 巖羊肌肉來源細胞
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雄性巖羊的骨骼肌組織。由中科院昆明細胞庫于2015年建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶 無
染色體
產品圖片:
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉湯基礎 規(guī)格: 100g 作用: 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(參考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名稱: CD36
肉浸液肉湯 規(guī)格: 250g 作用: 用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)(GB標準) 英文名稱: KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規(guī)格: 250g 作用: 用于溶血性鏈球菌及其它營養(yǎng)要求較高的細菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名稱: CD97
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 作用: 用于營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)及溶血試驗,還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱: NTRK3
血瓊脂培養(yǎng)基基礎 規(guī)格: 250g 作用: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養(yǎng)基,用于營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)及溶血試驗(GB 4789.10-... 英文名稱: HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 作用: 可廣泛應用于細菌的培養(yǎng),特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟... 英文名稱: HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格: 2x5支 作用: 試劑A和試劑B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名稱: SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規(guī)格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱: IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規(guī)格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名稱: IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規(guī)格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名稱: PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規(guī)格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名稱: TNF
1.0g 牛膝 TLC法鑒別 121066-200504
1g 蘇木 TLC法鑒別 121067-200604
5.0g 杜仲葉 TLC法鑒別 121068-9901
2g 忍冬藤 TLC法鑒別 121069-201004
3g 知母 TLC法鑒別 121070-200804
2.0g 狗脊 TLC法鑒別 121071-200903
0.5g 枸杞子 TLC法鑒別 121072-201007
0.5g 胡黃連 TLC法鑒別 121073-200602
1.0g 萊菔子 TLC法鑒別 121074-200402
5.0g 桑寄生 TLC法鑒別 121075-200402
4.0g 救必應 TLC法鑒別 121076-200602
1.2g 積雪草 TLC法鑒別 121077-200602
1.0g 五倍子 TLC法鑒別 121078-200402
4.0g 辛夷(望春花) TLC法鑒別 121079-200403
0.5g 阿魏 TLC法鑒別 121080-
1g 澤瀉 TLC法鑒別 121081-200603
0.5g 穿心蓮 TLC法鑒別 121082-201004
1.5g 棉花根 TLC法鑒別 121083-9901
2g 藏菖蒲 TLC法鑒別 121084-201003
1.0g 芫花條 TLC法鑒別 1210
人、大、小鼠T淋巴細胞受體抗體IgG
Anti-Phospho-Bcr(p-Tyr177)/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化T淋巴細胞受體抗體IgG
Anti-BCRP/ABCG2/BXP-21 /FITC 熒光素標記三磷酸腺苷結合轉運蛋白G超家族成員2抗體IgG
Anti-Bdkrb2/B2R/FITC 熒光素標記緩激肽B2受體抗體IgG
Anti-BDNF/FITC 熒光素標記BDNF蛋白抗體IgG
Anti-BECN1/FITC 熒光素標記一種抑癌基因抗體IgG
Anti-EpCAM/CD326/FITC 熒光素標記上皮細胞特異性EpCAM/CD326蛋白抗體IgG
Anti-Beta-casein( Beta-casein)/FITC 熒光素標記 β-酪蛋白(抗體)IgG
Anti-BFGF/FITC 熒光素標記堿性成纖維細胞生長因子抗體IgG
Anti-BGP/FITC 熒光素標記骨保護蛋白/骨鈣素抗體IgG
Anti-Bid/FITC 熒光素標記BH3結構域凋亡誘導蛋白抗體IgG
Anti-AQP-2/HRP (aquaporin Protein-2) 辣根過氧化物酶標記水通道蛋白-2抗體IgG
Anti-BIN1/FITC 熒光素標記橋連整合因子蛋白抗體IgG
Anti-Bim/FITC 熒光素標記細胞死亡調解子抗體IgG
Anti-phospho-Bim(Ser55) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化細胞死亡調解子抗體IgG
Anti-Bim(phospho Ser87)/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化細胞死亡調解子抗體IgG
Anti-phospho-Bim(Ser69) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化細胞死亡調解子抗體IgG
Anti-BIRC5/FITC 熒光素標記細胞凋亡抑制因子5抗體IgG
Anti-CD203c/FITC 熒光素標記CD203c抗體IgG
Anti-CD203c/RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標記抗CD203c抗體IgG
巖羊肌肉來源細胞Anti-BNP/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗人腦鈉素抗體IgG
Anti-CD31/HRP 辣根過氧化物酶標記CD31抗體IgG
Anti-BK channel/FITC 熒光素標記BK通道蛋白抗體IgG
Anti-BKCa channels/FITC 熒光素標記鈣激
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富,可提高轉化效率)。
4. 37℃,225 rpm復蘇60分鐘或30℃,225 rpm復蘇90分鐘。
(當質粒中含有不穩(wěn)定片段時,30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率,若轉化control pUC19計算轉化效率,則需37℃,225 rpm復蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。