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細胞名稱 家雞胚胎來源細胞
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一孵育11天的家雞胚胎組織。由中科院昆明細胞庫于2015年建立。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶 無
染色體
細胞種類
凍存
對培養的細胞進行凍存的方法是將細胞置于含有(DMSO)等冷凍保護劑的*培養基中于液氮中儲存。冷凍保護劑可降低培養基的冰點,并可減緩冷卻速度嗎,大大降低冰晶形成的危險 (冰晶可損傷細胞,導致細胞死亡)。
注:DMSO 可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時,應采用與此類物質安全危害相適應的設備和操作規范,并應按照當地法規處置此類試劑。
細胞凍存指導原則
凍存細胞系以備將來之用時,必須遵守以下原則。與其他細胞培養操作一樣,我們建議您嚴格遵守您所用細胞系附帶的操作說明,以便獲得結果。
1)在高細胞濃度情況下進行培養細胞的凍存,并且細胞傳代次數盡可能少。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意凍存條件取決于所用細胞系。
2)細胞應緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3)必須使用推薦的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑
4)將冷凍的細胞于 -70°C 以下溫度儲存;溫度高于 -50°C 時,冷凍的細胞將開始變質。
5)必須使用無菌凍存管儲存冷凍的細胞。裝有冷凍細胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內保存
6)必須穿戴個人防護設備。
7)所有與細胞接觸的溶液和設備均應為無菌狀態。必須采用正確的無菌技術,并且在層流通風櫥內進行。
凍存培養基
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養基。
1)細胞凍存培養基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養基,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養細胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養容器上脫離下來。用該細胞所需*培養基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度,計算凍存培養基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
85-9901
1.5g 雞蛋花 TLC法鑒別 121086-200602
1.0g 地骨皮(枸杞) TLC法鑒別 121087-200603
2.5g 山芝麻 TLC法鑒別 121088-200702
1g 金蓮花 TLC法鑒別 121089-200903
2g 土木香 TLC法鑒別 121090-
2g 川木香(川木香) TLC法鑒別 121091-200903
0.5g 赤芍(川赤芍) TLC法鑒別 121092-200402
0.5g 赤芍(芍藥) TLC法鑒別 121093-200402
1.5g 王不留行 TLC法鑒別 121094-200703
50mg 牛膽粉 TLC法鑒別 121095-200502
1.0g 烏藥 TLC法鑒別 121096-200503
2.0g 火麻仁 TLC法鑒別 121097-200703
1g 石菖蒲 TLC法鑒別 121098-200904
1.0g 土荊皮(金錢松) TLC法鑒別 121099-200101
1.0g 百合 TLC法鑒別 121100-200402
1.0g 肉蓯蓉 TLC法鑒別 121101-200402
3.0g 紅大戟 TLC法鑒別 121102-200202
5g 紅芪 TLC法鑒別 121103-200602
2.0g. 卷柏(墊狀卷柏) TLC法鑒別 121104-200301
10g 麥芽 TLC法鑒別 121105-200803
2.0g 花椒 TLC法鑒別 121106-200903
1.0g 蘆根 TLC法鑒別 121107-201003
10.0g 扶芳藤 TLC法鑒別 121108-200702
1.0g 伸筋草 TLC法鑒別 121109-200401
活鉀通道蛋白抗體IgG
Anti-Bmi1/PCGF4/FITC 熒光素標記組蛋白相關Bmi1抗體IgG
Anti-BLAME/SLAMF8/FITC 熒光素標記BLAME抗體IgG
Anti-BLNK/B-cell linker protein /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠T淋巴細胞連接蛋白抗體IgG
Anti-Phospho-BLNK(p-Tyr96) /FITC 熒光素標記兔抗人磷酸化T淋巴細胞連接蛋白抗體IgG
Anti-BMP2/FITC 熒光素標記骨形態發生蛋白-2抗體IgG
Anti-BMP4/FITC 熒光素標記骨形態發生蛋白4抗體IgG
Anti-BMP6/FITC 熒光素標記骨形態發生蛋白6抗體IgG
Anti-BMP-7/FITC 熒光素標記骨形態發生蛋白-7抗體IgG
Anti-BMP8/FITC 熒光素標記骨形態發生蛋白8抗體IgG
Anti-BMPR-1A/FITC 熒光素標記骨成型蛋白受體1A抗體IgG
Anti-BNP/FITC 熒光素標記腦鈉素抗體IgG
Anti-BNP/FITC 熒光素標記腦鈉素抗體IgG
Anti-BRN3A /FITC 熒光素標記轉錄因子Brn3蛋白抗體IgG
Anti-BOb-1/FITC 熒光素標記B細胞特異性轉錄因子抗體IgG
Anti-BRAF/FITC 熒光素標記黑素瘤相關蛋白抗體IgG
Anti-B Raf(phospho S365) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化B-Raf抗體IgG
Anti-phospho-B-Raf (Ser445)/FITC 熒光素標記磷酸化B-Raf抗體IgG
Anti-phospho-B-Raf (Ser601) /FITC 熒光素標記磷酸化B-Raf抗體IgG
Anti-BRCA1(human)/FITC 熒光素標記癌易感基因1抗體(人)IgG
Anti-BRCA1(mouse rat)/FITC 熒光素標記癌易感基因1抗體(小鼠 大鼠)IgG
家雞胚胎來源細胞Anti-BRCA1(Phospho Ser1524) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化癌易感基因1抗體IgG
Anti-BRCA2/FITC 熒光素標記癌易
2.0g 雞冠花 TLC法鑒別 121110-20070
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