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細胞名稱 大耳山羊肺細胞;LDG-1
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雄性大耳山羊的肺組織。1990年由中國科學院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P4
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
細胞種類
凍存
對培養(yǎng)的細胞進行凍存的方法是將細胞置于含有(DMSO)等冷凍保護劑的*培養(yǎng)基中于液氮中儲存。冷凍保護劑可降低培養(yǎng)基的冰點,并可減緩冷卻速度嗎,大大降低冰晶形成的危險 (冰晶可損傷細胞,導致細胞死亡)。
注:DMSO 可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時,應采用與此類物質(zhì)安全危害相適應的設備和操作規(guī)范,并應按照當?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。
細胞凍存指導原則
凍存細胞系以備將來之用時,必須遵守以下原則。與其他細胞培養(yǎng)操作一樣,我們建議您嚴格遵守您所用細胞系附帶的操作說明,以便獲得結果。
1)在高細胞濃度情況下進行培養(yǎng)細胞的凍存,并且細胞傳代次數(shù)盡可能少。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意凍存條件取決于所用細胞系。
2)細胞應緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑
4)將冷凍的細胞于 -70°C 以下溫度儲存;溫度高于 -50°C 時,冷凍的細胞將開始變質(zhì)。
5)必須使用無菌凍存管儲存冷凍的細胞。裝有冷凍細胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內(nèi)保存
6)必須穿戴個人防護設備。
7)所有與細胞接觸的溶液和設備均應為無菌狀態(tài)。必須采用正確的無菌技術,并且在層流通風櫥內(nèi)進行。
凍存培養(yǎng)基
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C?;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
100174-200402
50mg 胡椒乙腈 檢查用 100175-200602
50mg 丙谷胺 含量測定 100176-200003
100mg 吡羅昔康 含量測定 100177-200603
50mg 吡嗪酰胺 含量測定 100178-200403
100mg 布洛芬 含量測定 100179-200303
100mg 倍他米松磷酸鈉 含量測定 100180-200902
50mg 比沙可啶 含量測定 100181-200402
100mg 雌二醇 含量測定 100182-200404
50mg 醋酸氯己定 含量測定 100183-201003
100mg 莪術醇 含量測定 100185-200506
50mg 2,6-二甲基酚 檢查用 100186-200201
100mg 氟尿嘧啶 含量測定 100187-200602
50mg 環(huán)戊噻嗪 含量測定 100188-199701
50mg 甲基多巴 含量測定 100189-199501
100mg 甲芬那酸 UV法溶出檢查 100190-200402
50mg 甲硝唑 含量測定 100191-200305
100mg 聯(lián)苯雙酯 含量測定 100192-200503
50mg 螺內(nèi)酯 檢查用 100193-199601
100mg 化鉀 含量測定
A Kit 大鼠抗IVIgG抗體
P53 ELISA Kit 大鼠P53
cGMP ELISA Kit 大鼠環(huán)磷酸鳥苷
NOS ELISA Kit 大鼠一氧化氮合成酶
iNOS ELISA KIT 大鼠誘導型一氧化氮合成酶
eNOS ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶
Lp-PL-A2 ELISA Kit 大鼠脂蛋白磷脂酶A2
HSP-90 ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白90
HSP-70 ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白70
HSP-40 ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白40
HSP-20 ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白20
A Beta1-40 ELISA Kit 大鼠β淀粉樣蛋白1-40
Cyclin-D3 ELISA Kit 大鼠細胞周期素D3
Cyclin-D2 ELISA Kit 大鼠細胞周期素D2
Cyclin-D1 ELISA Kit 大鼠細胞周期素D1
MBP ELISA Kit 大鼠髓磷脂堿性蛋白
AFP ELISA Kit 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白
PAP ELISA Kit 大鼠前列腺酸性磷酸酶
大耳山羊肺細胞;LDG-1fPSA ELISA Kit 大鼠游離前列腺特異性抗原
PSA ELISA Kit 大鼠前列腺特異性抗原
大鼠卵巢癌標志物CA125ELISA Kit 大鼠卵巢癌標志物CA125
大鼠癌標志物-CA153ELISA Kit 大鼠