細胞名稱 綿羊肺細胞;OAR-L1
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雌性綿羊的肺組織。1990年由中國科學院昆明細胞庫建立。
培養條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
產品圖片:
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉湯基礎 規格: 100g 作用: 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(參考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名稱: CD36
肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(GB標準) 英文名稱: KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于溶血性鏈球菌及其它營養要求較高的細菌的增菌培養(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名稱: CD97
哥倫比亞瓊脂培養基 規格: 250g 作用: 用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗,還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱: NTRK3
血瓊脂培養基基礎 規格: 250g 作用: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養基,用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗(GB 4789.10-... 英文名稱: HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養基 規格: 250g 作用: 可廣泛應用于細菌的培養,特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養及蠟... 英文名稱: HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規格: 2x5支 作用: 試劑A和試劑B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名稱: SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱: IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名稱: IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名稱: PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名稱: TNF
0
1g 磺胺(熔點166℃) 熔點對照品 100096-199404
1g 茴香酸(熔點185℃) 熔點對照品 100097-199402
1g 磺胺二甲嘧啶(熔點200℃) 熔點對照品 100098-200804
1g 雙氰胺(熔點℃) 熔點對照品 10099-199402
1g 糖精(熔點229℃) 熔點對照品 100100-200804
1g 酚酞(熔點263℃) 熔點對照品 100102-199404
20片/瓶 水楊酸片 溶出度校正片 100103-200610
50mg 氨基己酸 鑒別 0105-9902
50m 水楊酸 含量測定 100106-200303
50mg α-甲基吡啶 檢查用 100109-200201
100mg 甲磺酸酚妥拉明 檢查用 100110-200602
50mg 鹽酸萘甲唑林 含量測定 10111-0103
200mg 阿司匹林 含量測定 100113-200603
50mg 氨苯砜 檢查用 100114-199101
100mg 煙酰胺 含量測定 100115-200703
100mg 鹽酸吡哆辛 含量測定 100116-200502
100mg 阿替洛爾 含量測定 100117-200504
50mg 倍他米松 含量測定 100118-200403
100mg 丙酸倍氯米松 含量測定 100119-200603
100mg 茶苯海明 含量測定 100120-200403
50mg 茶堿 含量測定 100121-199903
100mg 醋酸地塞米松 含量測定 100122-200804
50mg 醋酸可的松 含量測定 100123-200303
50mg 醋酸潑尼松龍 含量測定 100124-200303
50mg 醋酸曲安奈德 含量測定
B7-2/sCD86 ELISA Kit 大鼠可溶性CD86
HIF-1 Alpha ELISA Kit 大鼠低氧誘導因子1α
Amylin ELISA Kit 大鼠胰淀素
LTC4 ELISA Kit 大鼠白三烯C4
Cyt-C ELISA Kit 大鼠細胞色素C
Ang- I ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅰ
MC Ab ELISA Kit 大鼠黑色素細胞抗體
DPP IV ELISA Kit 大鼠二肽基肽酶Ⅳ
C4a ELISA Kit 大鼠過敏毒素/補體片斷4a
C5a ELISA Kit 大鼠補體片斷5a
C3a ELISA Kit 大鼠補體片斷3a
FS ELISA Kit 大鼠卵泡抑素
HD ELISA Kit 大鼠組織蛋白去乙酰化酶
E-Selectin/CD62E ELISA Kit 大鼠E選擇素
Methylase ELISA Kit 大鼠甲基化酶
PCNA ELISA Kit 大鼠抗增殖細胞核抗原抗體
LPL ELISA Kit 大鼠脂蛋白脂酶
TRACP-5b ELISA Kit 大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b
GIP ELISA Kit 大鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽
綿羊肺細胞;OAR-L1GP-II ELISA Kit 大鼠糖原磷酸化酶同工酶II
GP-MM ELISA Kit 大鼠糖原磷酸化酶同工酶MM
GP-BB ELISA Kit 大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB
TAb ELISA Kit 大鼠甲狀腺素抗體
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養基(S.O.C.營養豐富,可提高轉化效率)。
4. 37℃,225 rpm復蘇60分鐘或30℃,225 rpm復蘇90分鐘。
(當質粒中含有不穩定片段時,30℃培養可降低錯誤重組的概率,若轉化control pUC19計算轉化效率,則需37℃,225 rpm復蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 或LB培養基上。