細胞名稱 山羊皮膚細胞;WGS1
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雄性山羊的耳組織。1990年由中科院昆明細胞庫建立。
培養條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
產品圖片:
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉湯基礎 規格: 100g 作用: 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(參考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名稱: CD36
肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(GB標準) 英文名稱: KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于溶血性鏈球菌及其它營養要求較高的細菌的增菌培養(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名稱: CD97
哥倫比亞瓊脂培養基 規格: 250g 作用: 用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗,還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱: NTRK3
血瓊脂培養基基礎 規格: 250g 作用: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養基,用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗(GB 4789.10-... 英文名稱: HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養基 規格: 250g 作用: 可廣泛應用于細菌的培養,特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養及蠟... 英文名稱: HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規格: 2x5支 作用: 試劑A和試劑B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名稱: SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱: IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名稱: IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名稱: PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名稱: TNF
022-200403
50mg 谷氨酸 鑒別 100023-198601
50mg 磺胺 含量測定 100024-198702
100mg 磺胺甲噁唑 含量測定 100025-200904
100mg 磺胺嘧啶 含量測定 100026-200903
100mg 炔諾孕酮 含量測定 100028-199907
100mg 甲萘醌 含量測定 100029-200009
100mg 甲巰咪唑 含量測定 100030-200504
100mg 甲氧芐啶 含量測定 100031-200304
50mg 己酸羥孕酮 100032-
100mg 己烯雌酚 含量測定 100033-200607
100mg 枸櫞酸氯米芬 含量測定 010034-200503
50mg 甲磺酸雙氫麥角毒堿
50mg 克霉唑 含量測定 100037-200306
100mg 鄰甲苯磺酰胺 檢查用 100038-200803
100mg 6-巰基嘌呤 檢查用 100039-200602
100mg 利血平 含量測定 100041-200311
50mg 2-氯-4-硝基苯胺 檢查用 100042-200002
50mg 氯普噻噸 檢查用 100043-199701
體
NF-κB p65 ELISA Kit 大鼠核因子κB亞基p65親和肽
TAFI ELISA Kit 大鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物
GP- II b III a/CD41+CD61 ELISA Kit 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa
TSP-1 ELISA Kit 大鼠血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1
ON ELISA Kit 大鼠骨粘連蛋白
FFA ELISA Kit 大鼠游離脂肪酸
FA ELISA Kit 大鼠葉酸
histon-H2b ELISA Kit 大鼠組蛋白H2b
NT-proBNP ELISA KIT 大鼠N端前腦鈉素
GR ELISA Kit 大鼠糖皮質類固醇受體
LHRH ELISA Kit 大鼠黃體生成素釋放激素
山羊皮膚細胞;WGS18-iso-PG ELISA Kit 大鼠8異前列腺素
IFI16/p16 ELISA Kit 大鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16
SDF-1a/CXCL12 ELISA Kit 大鼠基質細胞衍生因子1a
GMP-140 ELISA Kit
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養基(S.O.C.營養豐富,可提高轉化效率)。
4. 37℃,225 rpm復蘇60分鐘或30℃,225 rpm復蘇90分鐘。
(當質粒中含有不穩定片段時,30℃培養可降低錯誤重組的概率,若轉化control pUC19計算轉化效率,則需37℃,225 rpm復蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 或LB培養基上。