細胞名稱 大鼠正常食管上皮細胞;RNEEC/HL-012
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
產品圖片:
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉湯基礎 規格: 100g 作用: 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(參考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名稱: CD36
肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(GB標準) 英文名稱: KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規格: 250g 作用: 用于溶血性鏈球菌及其它營養要求較高的細菌的增菌培養(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名稱: CD97
哥倫比亞瓊脂培養基 規格: 250g 作用: 用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗,還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱: NTRK3
血瓊脂培養基基礎 規格: 250g 作用: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養基,用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗(GB 4789.10-... 英文名稱: HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養基 規格: 250g 作用: 可廣泛應用于細菌的培養,特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養及蠟... 英文名稱: HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規格: 2x5支 作用: 試劑A和試劑B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名稱: SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱: IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名稱: IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名稱: PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名稱: TNF
8% "
商陸皂苷元 Phytolaccagenin "≥98% "
圣草次苷 Eriocitrin "≥98% "
圣草次苷,圣草枸楷苷 Eriocitrin "≥98% "
"石吊蘭素 " Lysionotin "≥98% "
石杉堿丙 Huperzine C 98%
石杉堿乙 Huperzine B "≥99% "
石松靈堿 Lycodoline ≥98%
"石蒜裂堿 " Lycorenin ≥98%
石蒜寧堿 Lycorenine "≥98% "
"矢車菊素3-O-葡萄糖苷 " Cyanidin 3-O-glucoside "≥98% "
薯蕷皂苷纖維二糖苷 Diosgenyl-3-di-β-O-glucopyranoside 98%
"薯蕷皂素 " Diosgenin "≥98% "
"雙脒苯脲 " Amicarbalide "≥95% "
水飛薊寧 Silydianin "≥98% "
水飛薊亭 Silychristin "≥98% "
穗花牡荊甙 Agnuside ≥98%
他克莫司(FK-506) Tacrolimus "≥98% "
"它勃寧 " Tabersonine "≥98% "
"藤黃酸 " Gambogic acid " ≥98% "
天名精內酯酮 Carabrone ≥98%
"甜橙黃酮 " Sinensetin "≥98% "
"頭花千金藤堿 " Cepharanthine "≥98% "
"千金藤素 " Cepharanthine "≥98% "
脫氫紫堇堿 Dehydrocorydalin "≥98% "
"脫水羊藿素 " Anhydroicaritin "≥98% "
"烏索酸 " Ursolic acid "≥98%
Anti-KCNA7 鉀電壓閥門通道混合器相關亞家族成員7抗體
Anti-KEAP1 胞質接頭蛋白Keap1抗體
Anti-Ki-67 (Proliferation Marker) Ki67蛋白抗體
Anti-Ki-67 (Proliferation Marker) Ki-67單克隆抗體
Anti-Kif14 protein 驅動蛋白家族Member14蛋白抗體
Anti-KIF17 驅動蛋白家族KIF17抗體
Anti-Kiss-1 腫瘤轉移抑制基因抗體
Anti-Klf4 腸道內富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白4抗體
Anti-KLF5 腸道內富含的Kruppel樣因子5抗體
Anti-phospho-Kinesin 5B (Ser272) 磷酸化Kinesin 5B抗體
Anti-phospho-Kinesin 5B (Ser275) Kinesin 5B抗體
Anti-KLF2 肺Kruppel樣因子抗體
Anti-KLF6 轉染抑癌基因KLF6抗體
Anti-KLF8 KLF樣轉錄因子8抗體
Anti-KLF9 轉錄因子KLF9抗體
Anti-KLF13/RFLAT-1 腸道內富含的Kruppel樣因子13
Anti-KLH 血藍蛋白抗體
Anti-KLH 血藍蛋白抗體
Anti-KLK1 激肽釋放酶1抗體
大鼠正常食管上皮細胞;RNEEC/HL-012Anti-kappa Opioid receptor kappa型阿片受體抗體
Anti-mu Opioid receptor μ-型阿片受體抗體
Anti-Phospho-mu Opioid Receptor (Ser375) 磷酸化μ-型阿片受體抗體
Anti-Delta Opioid Receptor D型阿片受體抗
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養基(S.O.C.營養豐富,可提高轉化效率)。
4. 37℃,225 rpm復蘇60分鐘或30℃,225 rpm復蘇90分鐘。
(當質粒中含有不穩定片段時,30℃培養可降低錯誤重組的概率,若轉化control pUC19計算轉化效率,則需37℃,225 rpm復蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 或LB培養基上。