副溶血性弧菌顯色培養(yǎng)基用于食品、海產(chǎn)品、病人糞便樣品和水產(chǎn)品中副溶血性弧菌的快速檢測(cè)。副溶血性弧菌顯藍(lán)綠色至藍(lán)色，其它弧菌顯無(wú)色；其它細(xì)菌顯黃色或無(wú)色，且細(xì)菌菌落很小。本培養(yǎng)基的特異性高，可以克服 TCBS 培養(yǎng)基引起的假陰性結(jié)果，是一種很理想的快速檢測(cè)培養(yǎng)基。
弧菌顯色培養(yǎng)基成份 (g/L)
特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) | 75.0 |
混合顯色劑 | 2.3 |
瓊脂 | 15.0 |
pH 8.6 ± 0.1 25 ℃ | |
此配方可以進(jìn)行改良或增加營(yíng)養(yǎng)成份以獲得*的結(jié)果。
注意
此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。
用法
稱取本品 18.46g 加入 200ml 蒸餾水，加熱煮沸溶解并不停攪拌，加熱 10-20 分鐘。冷卻至 45-50 ℃時(shí)，傾入無(wú)菌平皿。
注意：制備好的培養(yǎng)基一定要保持表面干燥，可在 37 ℃的培養(yǎng)箱中倒置放置 1-2 小時(shí)。
貯存
制備好的平板可保存 2-5 天，應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處， 保存溫度 2-8 ℃，注意避光保存。
失效
干燥培養(yǎng)基超過(guò)保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。
操作步驟
1、按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、 SN 標(biāo)準(zhǔn)、 FDA 標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液；
2、取 1ml 樣品液加入 9mlSCPB 肉湯或堿性蛋白胨水中， 37 ℃ 增菌培養(yǎng) 18-24 小時(shí)；
3 、用 3mm 接種環(huán)取 1 環(huán)增菌液，劃線接種到副溶血性上，做 2 個(gè)平板；
4 、 37 ℃培養(yǎng) 18-24h ， 溶血性弧菌顯藍(lán)色至藍(lán)綠色 ， 霍亂弧菌和其它弧菌顯無(wú)色 ，其它細(xì)菌顯黃色或無(wú)色且菌落很小；
5 、對(duì)可疑菌落可劃線接種到營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上， 36 ± 1 ℃培養(yǎng) 12-16 小時(shí)，挑取單菌落做副溶血性弧菌全套生化試驗(yàn)。
質(zhì)量控制
1 、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻，具有良好的流動(dòng)性，呈淡黃色。制備好的平板呈淡黃色固體培養(yǎng)基。
2 、微生物試驗(yàn)
在 36 ± 1 ℃培養(yǎng) 18-24h 小時(shí)：
質(zhì)控菌株 | ATCC | 生長(zhǎng)情況 | 菌落顏色 |
副溶血性弧菌 | +++ | 藍(lán)色至藍(lán)綠色 | |
* | 25923 | - | - |
大腸桿菌 | 25922 | -/+ | 無(wú)色 |
溶藻弧菌 | +++ | 無(wú)色 | |
霍亂弧菌 | +++ | 無(wú)色 |
方法的局限性
本培養(yǎng)基不能直接鑒定霍亂弧菌，副溶血性弧菌的特異性可達(dá) 90% ，準(zhǔn)確性非常高，有時(shí)可能需做其它補(bǔ)充試驗(yàn)。
典型特征
典型副溶血性弧菌顯藍(lán)色至藍(lán)綠色 ， 霍亂弧菌和其它弧菌顯無(wú)色。
