膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗體(antibody,Ab)是機體免疫系統受到抗原刺激后產生的特異性球蛋白,稱免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。根據其重鏈穩定區的分子結構和抗原性的不同,可將為類Ig分為IgG、IgA、IgM、IgD和IgE等五大類。由遺傳基因決定所產生的抗體,稱天然抗體(natural antibody),由抗原激發免疫細胞產生的抗體,稱免疫抗體(immune antibody)或稱特異地性抗體。人工制備的特異性抗體又可分為多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類型。
檢測病原體常用的膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗體有人工制備的特異性多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類型。
操作步驟:
1取適量Protein A+G Beads懸液,裝入層析柱,用10倍柱體積的PBS(或者TBS,下同)洗滌平衡層析柱。
2含抗體的血清或其它體液高速離心后,將上清與等體積2×PBS緩沖液混合,調整pH以及離子濃度后(確認pH值為7±0.5),緩慢加入層析柱。
3用10倍柱體積以上的PBS洗滌,至流出液無蛋白檢出。
4加入2倍柱體積0.1 M 檸檬酸(Citrate Acid, pH 2.7)封閉流出管,靜置5分鐘后收集穿出液,重復三次。測定 OD280估算抗體濃度,如果所得抗體較多可以使用SDS-PAGE檢測純度。也可以選擇0.1 M*(Glycine, pH 3.0)洗脫。
5洗脫后的抗體立即加入2/5體積的1 M Tris,pH 9.0中和,使用Millipore蛋白濃縮管切換到所需緩沖液,或者透析,緩沖液通常為PBS含有0.02% NaN3以及1 mM EDTA。
6濃縮到所需體積,加入50%甘油;測定效價后,分裝并保存在-20℃,避免凍結。
相關產品如下:hz-9773R C10orf63/Enkurin 10號染色體開放閱讀框63抗體
hz-9774R C10orf132/GOLGA7B 10號染色體開放閱讀框132抗體
hz-9775R C10orf30/BEND7 10號染色體開放閱讀框30抗體
hz-9776R C10orf140 10號染色體開放閱讀框140抗體
hz-9777R C1orf125 1號染色體開放閱讀框125抗體
hz-9778R C1orf129 1號染色體開放閱讀框129抗體
hz-9779R C1orf159 1號染色體開放閱讀框159抗體
hz-9780R C1orf163 1號染色體開放閱讀框163抗體
hz-9781R C1orf172 1號染色體開放閱讀框172抗體
hz-9782R C1orf2/COTE1 1號染色體開放閱讀框2抗體
hz-9783R C1orf19/SEN15 1號染色體開放閱讀框19抗體
hz-9784R C1orf25 1號染色體開放閱讀框25抗體
hz-9785R C1orf31 1號染色體開放閱讀框31抗體
hz-9786R C1orf51 1號染色體開放閱讀框51抗體
hz-9787R C1orf52 1號染色體開放閱讀框52抗體
hz-9788R C1orf67/DNAH14 1號染色體開放閱讀框67抗體
hz-9789R C1orf83 1號染色體開放閱讀框83抗體
hz-9790R AFAP/AFAP-110 微絲相關蛋白1抗體
hz-9791R C1ORF111 1號染色體開放閱讀框111抗體
hz-9792R C1ORF74 1號染色體開放閱讀框74抗體
hz-9793R C1QL2/C1QTNF10 補體C1q和腫瘤壞死因子相關蛋白10
hz-9794R C1orf93 1號染色體開放閱讀框93抗體
hz-9795R C1orf94 1號染色體開放閱讀框94抗體
hz-9796R C1orf96 1號染色體開放閱讀框96抗體
hz-9797R C1orf103 1號染色體開放閱讀框103抗體
hz-9798R C1orf41/HSB11 1號染色體開放閱讀框41抗體
hz-9799R C1orf144 1號染色體開放閱讀框144抗體
hz-0112M APP/ABPP 淀粉樣肽前體蛋白抗體
hz-9801R C1orf157 1號染色體開放閱讀框57抗體