正常小鼠睪丸Leydig細胞,TM3細胞的形態學檢測
光學顯微鏡和倒置顯微鏡
1未染色細胞:凋亡細胞的體積變小、變形,細胞膜完整但出現發泡現象,細胞凋亡晚期可見凋亡小體。貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落。
2染色細胞:常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化,核膜裂解、染色質分割成塊狀和凋亡小體等典型的凋亡形態。
支原體是一種大小介于細菌和病毒之間(zui小直徑0.2um)并獨立生活的微生物.約有1%可通過濾菌器。支原體無細胞壁形態呈高度多形性.可為圓形、絲狀或梨形。
支原體形態多變,在光境下不易看清內部結構。電鏡下觀察支原體膜為三層結構.其*有電干密度大的密集顆粒群或絲狀的中心束。支原體多吸附或散在于細胞表面和細胞之間。橫斷面與正常小鼠睪丸Leydig細胞,TM3細胞微絨毛相似,但微絨毛電子密度比支原體小,且*無顆粒群
或*束。
支原體代謝需固醇類物質、部分種類需要*、O 2或葡萄糖,每一種支原體都有自身持點。多數支原體適合于偏堿條件下生存(PH7.6—8.0),對酸耐受性差。對熱比較敏感,對一般抗生素不敏感。
DNA斷化檢測
細胞凋亡時主要的生化特征是其染色質發生濃縮, 染色質DNA在核小體單位之間的連接處斷裂, 形成50~300kbp長的DNA大片段, 或180~200bp整數倍的寡核苷酸片段, 在凝膠電泳上表現為梯形電泳圖譜(DNA ladder)。正常小鼠睪丸Leydig細胞,TM3細胞經處理后,采用常規方法分離提純DNA,進行瓊脂糖凝膠和溴化乙啶染色,在凋亡細胞群中可觀察到典型的DNA ladder。如果細胞量很少,還可在分離提純DNA后,用32P-ATP和脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)使DNA標記,然后進行電泳和放射自顯影,觀察凋亡細胞中DNA ladder的形成。
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