人大動脈平滑肌細(xì)胞,HASMC細(xì)胞基本特性
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞數(shù)量:1×106個細(xì)胞數(shù)
細(xì)胞傳代:1:2傳代
人大動脈平滑肌細(xì)胞,HASMC細(xì)胞的原位染色
(1)貼壁生長的對數(shù)期細(xì)胞鋪在24孔或6孔板中(內(nèi)有潔凈蓋玻片),讓其爬片生長,待長到50%~80%滿時,凋亡誘導(dǎo)劑處理細(xì)胞。
(2)將不同時間點(diǎn)處理的細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光染色,染色步驟同上。
(3)將染色的爬片細(xì)胞放于一張滴有少量甘油(5ml)的載玻片上,熒光顯微鏡或共聚焦激光掃描顯微鏡觀察TFAR19在細(xì)胞中的定位。
臨床病理切片的染色、檢測。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)、檢測。
分析TFAR19蛋白在人體內(nèi)各組織器官的分布及定位
透射電子顯微鏡觀察
結(jié)果評判:凋亡細(xì)胞體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮。凋亡Ⅰ期(pro-apoptosis nuclei)的細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)高度盤繞,出現(xiàn)許多稱為氣穴現(xiàn)象(cavitations)的空泡結(jié)構(gòu);Ⅱa期細(xì)胞核的染色質(zhì)高度凝聚、邊緣化;細(xì)胞凋亡的晚期,細(xì)胞核裂解為碎塊,產(chǎn)生凋亡小體。
DNA片斷化檢測
細(xì)胞凋亡時主要的生化特征是其染色質(zhì)發(fā)生濃縮, 染色質(zhì)DNA在核小體單位之間的連接處斷裂, 形成50~300kbp長的DNA大片段, 或180~200bp整數(shù)倍的寡核苷酸片段, 在凝膠電泳上表現(xiàn)為梯形電泳圖譜(DNA ladder)。人大動脈平滑肌細(xì)胞,HASMC細(xì)胞經(jīng)處理后,采用常規(guī)方法分離提純DNA,進(jìn)行瓊脂糖凝膠和溴化乙啶染色,在凋亡細(xì)胞群中可觀察到典型的DNA ladder。如果細(xì)胞量很少,還可在分離提純DNA后,用32P-ATP和脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)使DNA標(biāo)記,然后進(jìn)行電泳和放射自顯影,觀察凋亡細(xì)胞中DNA ladder的形成。
大分子染色體DNA片段的測定
細(xì)胞凋亡的早期,染色體斷裂成為50~300kbp長的DNA大片段。所有超過一定分子量大小的雙鏈DNA分子在瓊脂糖凝膠中的遷移速度相同。線性DNA的雙螺旋半徑超過凝膠半徑時,即達(dá)到分辨力的極限。此時凝膠不再按分子量的大小來篩分DNA,DNA像通過彎管一樣,以其一端指向電場一極而通過凝膠,這種遷移模式稱之為"爬行"。因此,細(xì)胞凋亡早期產(chǎn)生的50~300kbp長的DNA大片段不能用普通的瓊脂糖凝膠電泳來分離。通常采用脈沖電泳技術(shù)可圓滿地解決這一問題。這個方法是在凝膠上外加正交的交變脈沖電場。每當(dāng)電場方向改變后,大的DNA分子便滯流在爬行管中,直至新的電場軸向重新定向后,才能繼續(xù)向前移動。DNA分子量越大,這種重排所需要的時間就越長。當(dāng)DNA分子變換方向的時間小于電脈沖周期時,DNA就可以按其分子量大小分開。
人大動脈平滑肌細(xì)胞,HASMC細(xì)胞相關(guān)產(chǎn)品如下:hz1585 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞,PC12細(xì)胞
hz1586 大鼠腎成纖微細(xì)胞,NRK-49F細(xì)胞
hz1587 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞,C6細(xì)胞
hz1588 大鼠乳腺腺癌細(xì)胞系 MADB106細(xì)胞
hz1589 大鼠乳腺癌細(xì)胞,SHZ-88細(xì)胞,
hz1590 大鼠乳腺癌細(xì)胞,MADB-106細(xì)胞
hz1591 大鼠肉瘤細(xì)胞,WK256細(xì)胞
hz1592 大鼠氣管上皮細(xì)胞,RTE細(xì)胞
hz1593 大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞,RN-c細(xì)胞
hz1594 大鼠腦膜細(xì)胞,RMC細(xì)胞
hz1595 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞,F98-RFP-puro細(xì)胞
hz1596 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞,C6細(xì)胞,
hz1597 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞,C6-RFP細(xì)胞
hz1598 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞,C6-EGFP-puro細(xì)胞
hz1599 大鼠腦間質(zhì)細(xì)胞,DI TNC1細(xì)胞
hz1600 大鼠卵巢癌細(xì)胞株 NUTU-19細(xì)胞
hz1601 大鼠巨噬細(xì)胞,MC細(xì)胞
hz1602 大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞,C6細(xì)胞
hz1603 大鼠回腸細(xì)胞,IEC-18細(xì)胞,
hz1604 大鼠滑膜細(xì)胞
hz1605 大鼠骨髓瘤細(xì)胞IR983F細(xì)胞
hz1606 大鼠骨髓瘤細(xì)胞,Y3-Ag1.2.3細(xì)胞
hz1607 大鼠骨肉瘤細(xì)胞,UMR-106細(xì)胞,
hz1608 大鼠骨肉瘤 VMR106細(xì)胞
hz1609 大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞,L6細(xì)胞
hz1610 大鼠肝星形細(xì)胞,HSC-T6細(xì)胞,
hz1611 大鼠肝星形細(xì)胞,CFSC-8B細(xì)胞
hz1612 大鼠肝星形細(xì)胞,CFSC-3H & 5H細(xì)胞
hz1613 大鼠肝星形細(xì)胞,CFSC-2G細(xì)胞