檢測(cè)原理酪丁酸梭菌
細(xì)胞發(fā)生凋亡或壞死，其細(xì)胞DNA均發(fā)生斷裂，細(xì)胞內(nèi)小分子量DNA斷增加，高分子DNA減少，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)DNA斷。但凋亡細(xì)胞DNA斷裂點(diǎn)均有規(guī)律的發(fā)生在核小體之間，出現(xiàn)180－200bpDNA斷，而壞死細(xì)胞的DNA斷裂點(diǎn)為無特征的雜亂片斷，利用此特征可以確定群體細(xì)胞的死亡，并可與壞死細(xì)胞區(qū)別，細(xì)胞繁殖以分裂方式進(jìn)行。細(xì)胞作為一個(gè)獨(dú)立生命單位，既有生長(zhǎng)繁殖，也有衰老死亡。細(xì)胞衰老是生物有機(jī)體衰老的基礎(chǔ)。在多細(xì)胞生物的個(gè)體發(fā)育過程中，細(xì)胞常常分化成各種構(gòu)造和功能不同的細(xì)胞，如肌細(xì)胞、紅細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等都屬于高度分化的細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，細(xì)胞便喪失其原來正常的功能，并無休止地分裂，形成腫瘤。
酪丁酸梭菌操作方法
固定 | 培養(yǎng)細(xì)胞的制片或冰凍切片用4%多聚甲醛固定30min(4℃)后，用80%酒精再固定2h（-20℃）。常規(guī)4%中性福爾馬林固定、石蠟包埋之切片進(jìn)行脫蠟、水化。 |
洗滌 | 玻片浸入PBS緩沖液，搖床上洗滌5min，三次。 |
反應(yīng) | 洗滌后的玻片用吸水紙吸干細(xì)胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加反應(yīng)液（每50μL反應(yīng)液含TdT酶0.5μL,標(biāo)記的-dUTP 1μL），使反應(yīng)液均勻地覆蓋于所有細(xì)胞或組織切片上，蓋上塑料蓋玻片，置濕盒中，37℃孵育1h。 |
終止反應(yīng) | 去掉塑料蓋玻片，將玻片置盛有洗滌緩沖液的染色缸內(nèi)，洗滌兩次，每次5min。 |
FITC標(biāo)記 | 洗滌后的玻片用吸水紙吸去細(xì)胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加FITC反應(yīng)液（含FITC 2.5μg/mL），室溫下避光孵育10min。 |
洗滌 | 將玻片置于洗滌緩沖液內(nèi)，洗兩次，每次5min。 |
PI復(fù)染 | 將玻片置于盛有PI染液的染色缸內(nèi)，室溫下避光染色30min。 |
封片 | 用蓋玻片直接蓋在含PI染液的玻片上，亦可用無色指甲油涂于蓋玻片四周邊緣，置暗盒中，盡早鏡檢觀察。 |
交貨時(shí)間 | 15~20天 |
傳代：
1.培養(yǎng)皿中的細(xì)胞覆蓋率達(dá)到80%-90%時(shí)要傳代。
2.把原有培養(yǎng)基吸掉。
3.加適當(dāng)?shù)?(能覆蓋細(xì)胞就行)，消化1-2分鐘。
4.細(xì)胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。
5.用移液槍吹打細(xì)胞，把細(xì)胞都懸浮起來。
6.把細(xì)胞吸到15ml的離心管中，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
7.倒掉上清液，加1-2ml培養(yǎng)基，把細(xì)胞都吹起來。
相關(guān)產(chǎn)品如下：hz0205 小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞系 C3H10細(xì)胞
hz0206 小鼠畸胎瘤細(xì)胞,P19細(xì)胞,
hz0207 小鼠畸胎瘤細(xì)胞,F9細(xì)胞
hz0208 小鼠紅白血病細(xì)胞,MEL細(xì)胞
hz0209 小鼠黑色素瘤細(xì)胞,B16細(xì)胞,
hz0210 小鼠黑色素瘤細(xì)胞,B16F1細(xì)胞
hz0211 小鼠黑色素瘤細(xì)胞,B16-F0-EGFP細(xì)胞
hz0212 小鼠黑色素瘤細(xì)胞,B16BL6細(xì)胞
hz0213 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞,B16F10細(xì)胞
hz0214 小鼠黑色瘤細(xì)胞,B16細(xì)胞
hz0215 小鼠骨髓細(xì)胞,FDC-P1細(xì)胞
hz0216 小鼠骨髓瘤細(xì)胞,SP2/0細(xì)胞
hz0217 小鼠骨髓瘤細(xì)胞,Sp2/0-Ag14細(xì)胞
hz0218 小鼠骨髓瘤細(xì)胞,P3X63Ag8細(xì)胞
hz0219 小鼠骨髓瘤細(xì)胞,P3-X63-Ag8.653細(xì)胞
hz0220 小鼠骨髓瘤細(xì)胞,P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細(xì)胞
hz0221 小鼠骨髓瘤細(xì)胞,NS1細(xì)胞
hz0222 小鼠骨髓瘤細(xì)胞,FO細(xì)胞
hz0223 小鼠骨髓瘤細(xì)胞,Fox-NY細(xì)胞
hz0224 小鼠骨髓瘤細(xì)胞
hz0225 小鼠骨髓瘤B淋巴細(xì)胞,SP2/MIL-6細(xì)胞
hz0226 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞,P9細(xì)胞
hz0227 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞,P9-EGFP-puro細(xì)胞
hz0228 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞,OP9細(xì)胞
hz0229 小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞,K7M2-WT細(xì)胞,
hz0230 小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞,MLTC-1細(xì)胞,
hz0231 小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞,TM3細(xì)胞,
hz0232 小鼠肛門肉瘤細(xì)胞,S-180細(xì)胞
hz0233 小鼠肝細(xì)胞,AML12細(xì)胞
hz0234 小鼠肝癌細(xì)胞,Hepa 1-6細(xì)胞
