檢測(cè)原理浮游球衣菌
細(xì)胞發(fā)生凋亡或壞死，其細(xì)胞DNA均發(fā)生斷裂，細(xì)胞內(nèi)小分子量DNA斷增加，高分子DNA減少，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)DNA斷。但凋亡細(xì)胞DNA斷裂點(diǎn)均有規(guī)律的發(fā)生在核小體之間，出現(xiàn)180－200bpDNA斷，而壞死細(xì)胞的DNA斷裂點(diǎn)為無特征的雜亂片斷，利用此特征可以確定群體細(xì)胞的死亡，并可與壞死細(xì)胞區(qū)別，細(xì)胞繁殖以分裂方式進(jìn)行。細(xì)胞作為一個(gè)獨(dú)立生命單位，既有生長(zhǎng)繁殖，也有衰老死亡。細(xì)胞衰老是生物有機(jī)體衰老的基礎(chǔ)。在多細(xì)胞生物的個(gè)體發(fā)育過程中，細(xì)胞常常分化成各種構(gòu)造和功能不同的細(xì)胞，如肌細(xì)胞、紅細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等都屬于高度分化的細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，細(xì)胞便喪失其原來正常的功能，并無休止地分裂，形成腫瘤。
浮游球衣菌操作方法
固定 | 培養(yǎng)細(xì)胞的制片或冰凍切片用4%多聚甲醛固定30min(4℃)后，用80%酒精再固定2h（-20℃）。常規(guī)4%中性福爾馬林固定、石蠟包埋之切片進(jìn)行脫蠟、水化。 |
洗滌 | 玻片浸入PBS緩沖液，搖床上洗滌5min，三次。 |
反應(yīng) | 洗滌后的玻片用吸水紙吸干細(xì)胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加反應(yīng)液（每50μL反應(yīng)液含TdT酶0.5μL,標(biāo)記的-dUTP 1μL），使反應(yīng)液均勻地覆蓋于所有細(xì)胞或組織切片上，蓋上塑料蓋玻片，置濕盒中，37℃孵育1h。 |
終止反應(yīng) | 去掉塑料蓋玻片，將玻片置盛有洗滌緩沖液的染色缸內(nèi)，洗滌兩次，每次5min。 |
FITC標(biāo)記 | 洗滌后的玻片用吸水紙吸去細(xì)胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加FITC反應(yīng)液（含FITC 2.5μg/mL），室溫下避光孵育10min。 |
洗滌 | 將玻片置于洗滌緩沖液內(nèi)，洗兩次，每次5min。 |
PI復(fù)染 | 將玻片置于盛有PI染液的染色缸內(nèi)，室溫下避光染色30min。 |
封片 | 用蓋玻片直接蓋在含PI染液的玻片上，亦可用無色指甲油涂于蓋玻片四周邊緣，置暗盒中，盡早鏡檢觀察。 |
交貨時(shí)間 | 15~20天 |
傳代：
1.培養(yǎng)皿中的細(xì)胞覆蓋率達(dá)到80%-90%時(shí)要傳代。
2.把原有培養(yǎng)基吸掉。
3.加適當(dāng)?shù)?(能覆蓋細(xì)胞就行)，消化1-2分鐘。
4.細(xì)胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。
5.用移液槍吹打細(xì)胞，把細(xì)胞都懸浮起來。
6.把細(xì)胞吸到15ml的離心管中，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
7.倒掉上清液，加1-2ml培養(yǎng)基，把細(xì)胞都吹起來。
相關(guān)產(chǎn)品如下：hz0992 人骨肉瘤細(xì)胞,HOS細(xì)胞
hz0993 人骨肉瘤細(xì)胞, U-2 OS細(xì)胞
hz0994 人宮頸腸轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞,CaSki細(xì)胞,
hz0995 人宮頸癌細(xì)胞(HPV-18 永生化細(xì)胞) HeLa229細(xì)胞
hz0996 人宮頸癌細(xì)胞,SiHa細(xì)胞
hz0997 人宮頸癌細(xì)胞,HeLa-S3細(xì)胞
hz0998 人宮頸癌細(xì)胞,Hela-RFP-puro細(xì)胞
hz0999 人宮頸癌細(xì)胞,Hela-Luc細(xì)胞
hz1000 人宮頸癌細(xì)胞,Hela P10s-11F細(xì)胞
hz1001 人宮頸癌細(xì)胞,HeLa 229細(xì)胞
hz1002 人宮頸癌細(xì)胞,CaSKi細(xì)胞
hz1003 人跟骨髓瘤細(xì)胞,Hp2/o細(xì)胞
hz1004 人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞,HO-8910PM細(xì)胞
hz1005 人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞,LM3細(xì)胞
hz1006 人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞,HCCLM3細(xì)胞
hz1007 人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞,95-D細(xì)胞
hz1008 人高轉(zhuǎn)移肺癌 95-D細(xì)胞
hz1009 人高分化結(jié)腸腺癌細(xì)胞系 THC-8307細(xì)胞
hz1010 人感染HCV肝癌細(xì)胞,HuH7-HCV細(xì)胞
hz1011 人肝轉(zhuǎn)移癌 HCCLMS細(xì)胞,
hz1012 人肝永生化細(xì)胞,THLE-3細(xì)胞
hz1013 人肝星形細(xì)胞正常 LX-2細(xì)胞
hz1014 人肝星形細(xì)胞,LX-2細(xì)胞
hz1015 人肝細(xì)胞正常 HL-7702細(xì)胞
hz1016 人肝細(xì)胞,QSG-7701細(xì)胞
hz1017 人肝細(xì)胞,FL62891細(xì)胞
hz1018 人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞,HIBEpiC細(xì)胞
hz1019 人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞,HuH-6細(xì)胞,
hz1020 人肝靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,ED-25細(xì)胞
hz1021 人肝膽管癌細(xì)胞,RBE細(xì)胞,
hz1022 人肝癌亞歷山大細(xì)胞,PLC/PRF/5細(xì)胞
