基礎(chǔ)煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)
絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在*(BSS)基礎(chǔ)上，添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養(yǎng)物質(zhì)。zui廣泛應(yīng)用的培養(yǎng)基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`s F12 也包括非必須氨基酸，維生素的范圍亦很廣，另外常規(guī)含有無機(jī)鹽和代謝添加劑（例如核苷酸）。MEM/F12 這兩種培養(yǎng)基各取1/2，形成神經(jīng)生物學(xué)zui通用的培養(yǎng)基。Dulbecco`s改良培養(yǎng)基——DMEM，現(xiàn)應(yīng)用于快速生長的細(xì)胞，同MEM含有相同的營養(yǎng)成分，但濃度高出2~4倍。選擇某種培養(yǎng)基，應(yīng)仔細(xì)了解成分表，應(yīng)知道大多數(shù)情形下培養(yǎng)基都有不足。例如，有些培養(yǎng)基在氨基酸中包括有*，而這種培養(yǎng)基雖廣泛用于神經(jīng)生物學(xué)領(lǐng)域，但它對某些對*敏感的可能有細(xì)胞外毒性損傷的神經(jīng)元而言，則并非*選擇，特別是如果神經(jīng)元生長在缺乏膠質(zhì)的環(huán)境中時(shí)。F12中含有*，據(jù)報(bào)道也有神經(jīng)毒效應(yīng)。
煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB) 制備方法：
1. 培養(yǎng)同源細(xì)胞（未克隆前時(shí)的同一細(xì)胞）至半?yún)R合狀態(tài)時(shí)，更換一次培養(yǎng)液，再繼續(xù)培養(yǎng)24~48小時(shí)后，吸出所有培養(yǎng)液。
2. 離心：3000~4000/分離心10分鐘，吸取上清液。
3. 濾過：再經(jīng)直徑0.22μm濾孔的濾膜過濾，低溫凍存貯備用；用時(shí)取1分適應(yīng)培養(yǎng)基+2培養(yǎng)基混合使用。
生長因子絕大多數(shù)哺乳類胚胎神經(jīng)元有嚴(yán)格的營養(yǎng)要求，若不能提供適宜的生長因子或合適的因子組分，將會(huì)使絕大多數(shù)神經(jīng)元在體外培養(yǎng)的數(shù)天中死亡。解決這一問題有兩條思路，一是讓培養(yǎng)細(xì)胞提供自己的營養(yǎng)因子，二是在煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB) 中加入純的生長因子。如果細(xì)胞混合物能在高密度時(shí)生長，所需的生長因子便會(huì)積累到可觀的數(shù)值，尤其當(dāng)培養(yǎng)基很少變化時(shí)。若某種細(xì)胞混合物生長時(shí)有很少的營養(yǎng)需求，可保持培養(yǎng)基在一段時(shí)間里不作任何變動(dòng)，以使?fàn)I養(yǎng)（生長）因子積累，而zui后促使所需要的細(xì)胞類型能夠生長。但是，這種對營養(yǎng)（生長）因子自身倚賴性亦有弊端，因?yàn)橥ǔＴ诨旌霞?xì)胞群體中細(xì)胞很難有同比例增殖，某些細(xì)胞會(huì)因生長條件的貧乏而受限制。另外，這種方法只能進(jìn)行相當(dāng)高密度的細(xì)胞培養(yǎng)。因?yàn)榕囵B(yǎng)基的條件在細(xì)胞的較低密度時(shí)變的不夠有效。不過某些時(shí)候純化神經(jīng)元群體的低密度培養(yǎng)可用條件培養(yǎng)基（經(jīng)過了高密度培養(yǎng)）進(jìn)行，或在膠質(zhì)上生長的神經(jīng)元所用過的培養(yǎng)基來支持。
滿足神經(jīng)元營養(yǎng)需求的第二條途徑是向培養(yǎng)基中加入生長因子。通常用于組培的通用適宜因子是神經(jīng)生長因子NGF。不過，只有少數(shù)對這種蛋白質(zhì)有反應(yīng)的細(xì)胞類型的細(xì)胞才能生長。
煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB) 相關(guān)產(chǎn)品如下：SF126 人腦瘤
SF17 人腦瘤
SF17 人腦瘤
SF763 人腦瘤
SF767 人腦瘤
SH-SY5Y 人骨髓神經(jīng)母細(xì)胞瘤
SK-BR-3 人乳腺癌細(xì)胞
SK-MEL-1 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞
SK-N-SH 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤
SK-OV-3 人卵巢腺瘤細(xì)胞
SMMC-7721 人肝癌細(xì)胞
SW13 人腎上腺皮質(zhì)瘤
SW480 人結(jié)直腸癌
T84 人結(jié)腸癌細(xì)胞
THP1 人單核細(xì)胞型淋巴瘤
U-2 OS 人骨肉瘤細(xì)胞
U251 人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤
U-937 人淋巴瘤細(xì)胞
3T3 swiss swiss鼠胚胎成纖維細(xì)胞
3T3L1 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(前脂肪)
3T6swiss 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
BA/F3 小鼠原B細(xì)胞
BHK-21 金黃地鼠腎
BS-C-1 非注洲綠猴腎
C2C12 小鼠成肌細(xì)胞
C3H 10T1/2 2A6 小鼠成纖維細(xì)胞
CHOdhfr 二氫*缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞
CHO-K1 中國倉鼠卵巢細(xì)胞
COS-1 非洲綠腎
COS-7 非洲綠猴腎細(xì)胞
