本公司專業(yè)代理ATCC細(xì)胞,提供售前售后一條龍服務(wù),若要獲取詳細(xì)人肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞;AE1201的說明書或價格信息,請咨詢在線客服。
細(xì)胞名稱 人肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞;AE1201
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C6
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
細(xì)胞種類
凍存
對培養(yǎng)的細(xì)胞進行凍存的方法是將細(xì)胞置于含有(DMSO)等冷凍保護劑的*培養(yǎng)基中于液氮中儲存。冷凍保護劑可降低培養(yǎng)基的冰點,并可減緩冷卻速度嗎,大大降低冰晶形成的危險 (冰晶可損傷細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。
注:DMSO 可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時,應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范,并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。
細(xì)胞凍存指導(dǎo)原則
凍存細(xì)胞系以備將來之用時,必須遵守以下原則。與其他細(xì)胞培養(yǎng)操作一樣,我們建議您嚴(yán)格遵守您所用細(xì)胞系附帶的操作說明,以便獲得結(jié)果。
1)在高細(xì)胞濃度情況下進行培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,并且細(xì)胞傳代次數(shù)盡可能少。確保凍存前活細(xì)胞百分比至少為90%。請注意凍存條件取決于所用細(xì)胞系。
2)細(xì)胞應(yīng)緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑
4)將冷凍的細(xì)胞于 -70°C 以下溫度儲存;溫度高于 -50°C 時,冷凍的細(xì)胞將開始變質(zhì)。
5)必須使用無菌凍存管儲存冷凍的細(xì)胞。裝有冷凍細(xì)胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內(nèi)保存
6)必須穿戴個人防護設(shè)備。
7)所有與細(xì)胞接觸的溶液和設(shè)備均應(yīng)為無菌狀態(tài)。必須采用正確的無菌技術(shù),并且在層流通風(fēng)櫥內(nèi)進行。
凍存培養(yǎng)基
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用 Countess®自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
.0M PH 10.0 STERILE 77-86-1 250ML 超純級
40%葡萄糖溶液 GLUCOSE 40% (W/V) 492-62-6 100ML 超純級
PBS溶液 PBS 20X PH 7.5 1L 超純級
PBS溶液 PBS 20X 500ML 超純級
IPTG溶液 IPTG 20MG/ML 1ML 超純級
四環(huán)素鹽酸鹽溶液 TETRACYCLINE 50MG/ML 20ML 超純級
硫酸卡那霉素溶液 KANAMYCIN 25 MG/ML 20ML 超純級
硫酸卡那霉素溶液 KANAMYCIN 50 MG/ML 20ML 超純級
PBS溶液,含0.05% 吐溫20 PBS-TWEEN PH 7.5 1L 超純級
PBS溶液,含0.05% 吐溫20 PBS-TWEEN PH 7.5 500ML 超純級
DENHARDT'S溶
Anti-Survivin/PE 熒光素PE標(biāo)記細(xì)胞凋亡抑制因子抗體IgG
Anti-SUR1/FITC 熒光素標(biāo)記磺酰脲類藥物受體1抗體IgG
Anti-SYK/FITC 熒光素標(biāo)記非受體型酪氨酸蛋白激酶抗體IgG
人肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞;AE1201Anti-Phospho-Syk (Tyr323) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化非受體型酪氨酸蛋白激酶抗體IgG
Anti-Phospho-Sy