本公司專業(yè)代理ATCC細胞,提供售前售后一條龍服務(wù),若要獲取詳細 人肺成纖維細胞;HFL1的說明書或價格信息,請咨詢在線客服。
細胞名稱 人肺成纖維細胞;HFL1
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 F12K 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(10+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
細胞種類
凍存
對培養(yǎng)的細胞進行凍存的方法是將細胞置于含有(DMSO)等冷凍保護劑的*培養(yǎng)基中于液氮中儲存。冷凍保護劑可降低培養(yǎng)基的冰點,并可減緩冷卻速度嗎,大大降低冰晶形成的危險 (冰晶可損傷細胞,導致細胞死亡)。
注:DMSO 可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時,應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范,并應(yīng)按照當?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。
細胞凍存指導原則
凍存細胞系以備將來之用時,必須遵守以下原則。與其他細胞培養(yǎng)操作一樣,我們建議您嚴格遵守您所用細胞系附帶的操作說明,以便獲得結(jié)果。
1)在高細胞濃度情況下進行培養(yǎng)細胞的凍存,并且細胞傳代次數(shù)盡可能少。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意凍存條件取決于所用細胞系。
2)細胞應(yīng)緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑
4)將冷凍的細胞于 -70°C 以下溫度儲存;溫度高于 -50°C 時,冷凍的細胞將開始變質(zhì)。
5)必須使用無菌凍存管儲存冷凍的細胞。裝有冷凍細胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內(nèi)保存
6)必須穿戴個人防護設(shè)備。
7)所有與細胞接觸的溶液和設(shè)備均應(yīng)為無菌狀態(tài)。必須采用正確的無菌技術(shù),并且在層流通風櫥內(nèi)進行。
凍存培養(yǎng)基
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
MAGE-1 黑色素瘤相關(guān)
MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG; 0.5mg MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG;) 髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b(抗原)
MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a 0.5mg MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a ) 髓鞘相關(guān)糖蛋白(抗原)
Mafa(avian 0.5mg v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗原 Mafa(avian)(V-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A) v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗原
MADCAM-1 黏膜選址素(抗原 0.5mg MADCAM-1 黏膜
Anti-RAMP-1/RBITC 紅色羅丹明標記受體活性調(diào)制蛋白1抗體IgG
Anti-CD86/B7-2/RBITC 紅色羅丹明標記CD86蛋白抗體抗體IgG
Anti-AT1R/RBITC 紅色羅丹明標記血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體IgG
C 熒光素標記
Anti-HAS/RBITC 紅色羅丹明標記人血清白蛋白抗體IgG
Anti-CD14/RBITC 紅色羅丹明標記CD14蛋白抗體IgG
Anti-NHE1/RBITC 紅色羅丹明標記鈉氫通道蛋白抗體IgG
CD97抗體IgG
Anti-CD99/E2 antigen/FITC 熒光素標記CD99抗體IgG
Anti-XAF1/FITC 熒光素標記XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗體IgG
Anti-XBP-1/FITC 熒光素標記細胞核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白抗體IgG
指蛋白300抗體IgG
/FITC 熒光素標記磷
人肺成纖維細胞;HFL1?Anti-WWOX /FITC 熒光素標記包含氧化還原酶的WW域抗體IgG
Anti-WIG-1/FITC 熒光素標記野生型p53誘導基因1抗體IgG
Anti-WIP1/FITC 熒光素標記原癌基因WIP1抗體IgG
Anti-WN