細胞名稱 人正常前列腺上皮細胞；RWPE-1
形態(tài)特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 腫瘤抑制基因： p53 + [PubMed: 9214605] pRB + [PubMed: 9214605] 一位正常男性前列腺組織切片的周圍區(qū)域的上皮細胞用單拷貝的人瘤病毒的18(HPV-18)進行轉(zhuǎn)化，建立了RWPE-1 (ATCC CRL-11609) 細胞株 [PubMed: 9214605]. 在三維Matrigel培養(yǎng)時，在雄激素作用下，RWPE-1細胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA。[PubMed: 11170142]. 當與Matrigel或基質(zhì)細胞混合注射雄性裸鼠時，RWPE
培養(yǎng)條件 這株細胞的基本培養(yǎng)基作為Invitrogen (GIBCO)提供的kit的部分： 角化細胞無血清培養(yǎng)基K-SFM，kit目錄號17005-042。隨kit提供這株細胞生長所需的兩種添加劑（牛垂體提取物BPE及人重組表皮生長因子EGF）。 配制*生長培養(yǎng)基，需添加以下成分： 0.05 mg/ml BPE – 隨K-SFM提供 5 ng/ml EGF -隨K-SFM提供。
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(52+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
產(chǎn)品圖片：
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉湯基礎 規(guī)格: 100g 作用： 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(參考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名稱： CD36
肉浸液肉湯 規(guī)格: 250g 作用： 用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)（GB標準） 英文名稱： KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規(guī)格: 250g 作用： 用于溶血性鏈球菌及其它營養(yǎng)要求較高的細菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名稱： CD97
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 作用： 用于營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)及溶血試驗，還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱： NTRK3
血瓊脂培養(yǎng)基基礎 規(guī)格: 250g 作用： 加入脫纖維羊血或兔血，制成血瓊脂培養(yǎng)基，用于營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)及溶血試驗(GB 4789.10－... 英文名稱： HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 作用： 可廣泛應用于細菌的培養(yǎng)，特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟... 英文名稱： HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格: 2x5支 作用： 試劑A和試劑B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名稱： SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規(guī)格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱： IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規(guī)格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名稱： IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規(guī)格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名稱： PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規(guī)格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名稱： TNF
Melamine/Bov IgG 三聚氰胺偶聯(lián)牛IgG
MEK1/MAPKK1(mitogen activated protein kinase kinase 1 0.5mg MEK1/MAPKK1(mitogen activated protein kinase kinase 1) MEK1/MAPKK1抗體(N-端)
MEF2(myocyte enhancer-binding factor 2 0.5mg 肌細胞增強因子2抗原 MEF2(myocyte enhancer-binding factor 2) 肌細胞增強因子2抗原
Measles virus protein(Plant2 derived measles virus hemagglutinin protein 0.5mg 麻疹病毒紅血球凝集素蛋白多肽 Measles virus protein(Plant2 derived measles virus hemagglutinin protein) 麻疹病毒紅血球凝集素蛋白多肽
Measles virus protein(Plant2 derived measles virus hemagglutinin protein 0.5mg 麻疹病毒紅血球凝集素蛋白多肽 Measles virus protein(Plant2 derived measles virus hemagglutinin protein) 麻疹病毒紅血球凝集素蛋白多肽
Measles virus of fusion protein 麻疹病毒抗原（麻疹病毒融合蛋白 0.5mg Measles virus of fusion protein 麻疹病毒抗原（麻疹病毒融合蛋白）
MDR1(multidrug resistance 1 0.5mg 多藥耐藥蛋白抗原 MDR
人正常前列腺上皮細胞；RWPE-1Anti-YBX-1/FITC 熒光素標記高保留轉(zhuǎn)錄因子抗體IgG
Anti-YY1/FITC 熒光素標記核轉(zhuǎn)錄因子YY1抗體IgG
Anti-ZAP-70/FITC 熒光素標記zeta相關蛋白70抗體IgG
/FITC 熒光
操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富，可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃，225 rpm復蘇60分鐘或30℃，225 rpm復蘇90分鐘。
(當質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時，30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control pUC19計算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。
