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細胞名稱 人胚胎肺成纖維細胞;WI-38
形態特性 成纖維細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 WI-38人二倍體細胞系來自3個月的正常胚胎肺組織。 該細胞系是首株用于人類疫苗制備的人二倍體細胞系。 培液中添加TNF alpha可以促進細胞生長。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優質胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 P(15+5)
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
細胞種類
凍存
對培養的細胞進行凍存的方法是將細胞置于含有(DMSO)等冷凍保護劑的*培養基中于液氮中儲存。冷凍保護劑可降低培養基的冰點,并可減緩冷卻速度嗎,大大降低冰晶形成的危險 (冰晶可損傷細胞,導致細胞死亡)。
注:DMSO 可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時,應采用與此類物質安全危害相適應的設備和操作規范,并應按照當地法規處置此類試劑。
細胞凍存指導原則
凍存細胞系以備將來之用時,必須遵守以下原則。與其他細胞培養操作一樣,我們建議您嚴格遵守您所用細胞系附帶的操作說明,以便獲得結果。
1)在高細胞濃度情況下進行培養細胞的凍存,并且細胞傳代次數盡可能少。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意凍存條件取決于所用細胞系。
2)細胞應緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3)必須使用推薦的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑
4)將冷凍的細胞于 -70°C 以下溫度儲存;溫度高于 -50°C 時,冷凍的細胞將開始變質。
5)必須使用無菌凍存管儲存冷凍的細胞。裝有冷凍細胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內保存
6)必須穿戴個人防護設備。
7)所有與細胞接觸的溶液和設備均應為無菌狀態。必須采用正確的無菌技術,并且在層流通風櫥內進行。
凍存培養基
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養基。
1)細胞凍存培養基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養基,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養細胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養容器上脫離下來。用該細胞所需*培養基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度,計算凍存培養基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
etronidazole/OVA 甲硝唑偶聯雞卵白蛋白
Metronidazole/KLH 甲硝唑偶聯牛血藍蛋白 10mg Metronidazole/KLH 甲硝唑偶聯牛血藍蛋白 Metronidazole/KLH 甲硝唑偶聯牛血藍蛋白
Metronidazole/BSA 甲硝唑偶聯牛血清白蛋白 10mg Metronidazole/BSA 甲硝唑偶聯牛血清白蛋白 Metronidazole/BSA 甲硝唑偶聯牛血清白蛋白
Metal ion transporter 擬南介金屬離子轉運蛋白(抗原 0.5mg Metal ion transporter 擬南介金屬離子轉運蛋白(抗原)
Melan-A/MART-1 黑色素-A(抗原 0.5mg Melan-A/MART-1 黑色素-A(抗原)
Melamine/OVA(ovalbumin 5mg 三聚氰胺與雞卵白蛋白偶聯物 Melamine/OVA(ovalbumin) 三聚氰胺與雞卵白蛋白偶聯物
Melamine/OVA 三聚氰胺偶聯雞卵白蛋白 1mg Melamine/OVA 三聚氰胺偶聯雞卵白蛋白 Melamine/OVA 三聚氰胺偶聯雞卵白蛋白
Melamine/KLH 三聚氰胺與血藍蛋白偶聯物 1mg Melamine/KLH 三聚氰胺與血藍蛋白偶聯物 Melamine/KLH 三聚氰胺與血藍蛋白偶聯物
Melamine/HRP 辣根過氧化物酶標記三聚氰胺 0.5ml Melamine/HRP 辣根過氧化物酶標記三聚氰胺 Melamine/HRP 辣根過氧化物酶標記三聚氰胺
Melamine/BSA 三聚氰胺與牛血清白蛋白偶聯物 1mg Melamine/BSA 三聚氰胺與牛血清白蛋白偶聯物 Melamine/BSA 三聚氰胺與牛血清白蛋白偶聯物
Anti-ZCWCC1/FITC 熒光素標記ZCWCC1抗體IgG
Anti-Z-DEVD-FMK/FITC 熒光素標記CASPASE3凋亡抑制劑IgG
Anti-Zfp91/FITC 熒光素標記白血病相關新基因抗體IgG
人胚胎肺成纖維細胞;WI-38?Anti-ZNF217
Melamine/BSA 三聚氰胺偶聯牛血清白蛋白 1mg Melamine/BSA 三聚氰胺偶聯牛血清白蛋白 Melamine/BSA 三聚氰胺偶聯牛血清白蛋白
Melamine/Bov IgG 三聚氰胺偶聯牛IgG 1mg Melamine/Bov IgG 三聚氰胺偶聯牛IgG