細(xì)胞名稱 人正常肝細(xì)胞；L-02

形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 L - 02細(xì)胞建系鑒定于1980年（葉秀珍等，1980)。該細(xì)胞是一株正常肝細(xì)胞系，具有典型的肝細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征，可用于多種實(shí)驗(yàn)研究。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS

傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況 C72

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 陰性

STR STR鑒定

同工酶

染色體

產(chǎn)品圖片：

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉湯基礎(chǔ) 規(guī)格:  100g 作用：  用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(參考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名稱： CD36
肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)） 英文名稱： KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于溶血性鏈球菌及其它營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名稱： CD97
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)，還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱： NTRK3
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格:  250g 作用：  加入脫纖維羊血或兔血，制成血瓊脂培養(yǎng)基，用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)(GB 4789.10－... 英文名稱： HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng)，特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟... 英文名稱： HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格:  2x5支 作用：  試劑A和試劑B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名稱： SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱： IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名稱： IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名稱： PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名稱： TNF

53抗原 Mtp53(Mutant type p53)  突變型P53抗原

mTOR(Mammalian target of rapamycin 0.5mg    雷帕霉素靶蛋白 mTOR(Mammalian target of rapamycin)  雷帕霉素靶蛋白

MTNR1B/MTNR-1B(Melatonin receptor 1B 0.5mg    褪黑素受體1B抗原 MTNR1B/MTNR-1B(Melatonin receptor 1B)  褪黑素受體1B抗原

MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells 0.5mg   MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又稱：MYC  致癌基因（抗原）

MT-II(Melanotan II Acetate 1g    醋酸美拉諾坦II MT-II(Melanotan II Acetate)  醋酸美拉諾坦II

MT(metallothionein 0.5mg    金屬硫蛋白抗原 MT(metallothionein)  金屬硫蛋白抗原

MSLN(mesothelin 0.5mg   MSLN(mesothelin)  間皮素(多肽抗原)

MSH2 (mutS homolog 2 0.5mg    MSH2抗原 MSH2 (mutS homolog 2)  MSH2抗原

MrpL28 (mitochondrial ribosomal protein L28 0.5mg   MrpL28 (mitochondrial ribosomal protein L28)  線粒體核糖體蛋白L28(抗原)

MRP5/ABCC5(Multidrug Resistanec-Associated Protein 5 0.5mg    多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗原 MRP5/ABCC5(Multidrug Resistanec-Associated Protein 5)  多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗原

MRP3(Multidrug Resistanec-Associated Protein 3 0.5mg   MRP3(Multidrug Resistanec-Associated Protein 3)  多藥耐藥相關(guān)蛋白3(抗原)

MRP2 (multidrug resistance-associated protein2 0.5mg    多藥耐藥相關(guān)蛋白2 MRP2 (multidrug resistance-associated protein2)  多藥耐藥相關(guān)蛋白2

MRP1(Multidrug Resistanec-Associated Protein 1 0.5mg   MRP1(Multidrug Resistanec-Associated Protein 1)  多藥耐藥相關(guān)蛋白1(抗原)

MPO peptide  髓過氧化物酶抗原 0.5mg MPO peptide  髓過氧化物酶抗原 MPO peptide  髓過氧化物酶抗原

mouse IgA  小鼠IgA 1mg mouse IgA  小鼠IgA mouse IgA  小鼠IgA

Morphine/KLH  嗎啡與血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物 5mg Morphine/KLH  嗎啡與血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物

Anti-Gentamicin/Gold   膠體金離子標(biāo)記兔慶大霉素抗體IgG

Anti-HBcAg/FITC  熒光素標(biāo)記小鼠抗人乙肝核心抗原抗體IgG

Anti-HBeAg/FITC  熒光素標(biāo)記小鼠抗人乙肝e抗原抗體（1）IgG

Anti-HBeAg/FITC  熒光素標(biāo)記小鼠抗人乙肝e抗原抗體（2）IgG

Anti-HBsAg/FITC  熒光素標(biāo)記小鼠抗人乙肝表面抗原抗體IgG

Anti-HBsAg/FITC  熒光素標(biāo)記山羊抗人乙肝表面抗原抗體 IgG

Anti-HAS/FITC  熒光素標(biāo)記鼠抗人血清白蛋白單克隆抗體IgG

Anti-SPECA/a-fodrin/FITC  熒光素標(biāo)記a-包襯蛋白抗體IgG

Anti- Alpha-AF/ Alpha-Afa/FITC  熒光素標(biāo)記α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗體IgG

人正常肝細(xì)胞；L-02Anti-AFP/FITC  熒光標(biāo)記鼠抗人甲胎蛋白單克隆抗體IgG

Anti-AFP/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記鼠抗人甲胎蛋白單克隆抗體（包被）IgG

Anti-AFP/Biotin  生物素化鼠抗人甲胎蛋白單克隆抗體（包被）IgG

Anti-AFP/HRP  辣根過氧化

操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富，可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃，225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí)，30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。