WISH(羊膜細胞)
【細胞復蘇的方法】:
(l)從液氮中取出冷凍管,迅速投入37~42℃水浴中,晃動,使其盡快融化(1分鐘左右)。
(2)用培養液稀釋至原體積的10倍以上,直接培養。
(3)或低速離心,去上清,加新鮮培養液培養。
傳代前準備:
1.預熱培養用液:把已經配制好的裝有培養液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入 37℃水浴鍋內預熱。
2.用 75%酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。
3.正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且可減少污染。
4.點燃酒精燈:注意火焰不能太小。
5.準備好將要使用的消毒后的空培養瓶,放入微波爐內高火,8 分鐘再次消毒。
6.取出預熱好的培養用液:取出已經預熱好的培養用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內。
7.從培養箱內取出細胞:注意取出細胞時要旋緊瓶蓋,用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面,再在鏡下觀察細胞。
8.打開瓶口:將各瓶口一一打開,同時要在酒精燈上燒口消毒。
細胞的相關產品如下:
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胰蛋白酶消化;
1.加入消化液:小心吸出舊培養液,用 PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),
注意消化液的量以蓋住細胞,*消化溫度是 37℃。
2. 顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度。
3.吸棄消化液加入培養液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養液。
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甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂基礎(MYP) Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base 用于蠟樣芽孢桿菌的固體平板計數(GB.SN標準)
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