上海閎巨優惠供應牛熱休克轉錄因子(HSF)ELISA試劑盒哪家好,并提供試劑盒價格、用途、規格、實驗原理、說明書、相關實驗操作等詳細信息。閎巨牛熱休克轉錄因子(HSF)ELISA試劑盒哪家好等各種ELISA試劑盒均采用的是定量夾心酶聯免疫技術。抗體具體為FGF6已經被預先涂到微孔板。標準和樣品吸入井和任何FGF6目前被綁定的固定化抗體。*共軛的抗體特異性FGF6除去任何未結合的物質后,加入到孔中。抗*蛋白共軛的辣根過氧化物酶(HRP)的洗滌后,加入到孔中。經過洗滌,以除去任何未結合的抗*蛋白的酶試劑,底物溶液加入到孔中,顯色成比例的量的初始步驟中的約束的FGF6。彩色顯影被停止并測量的顏色的強度。
此種方法ELISA試劑盒,具有較高的靈敏度和特異性好,檢測鼠標FGF6。觀察鼠標FGF6和類似物之間無顯著交叉反應或干擾。
【操作步驟】
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加*40μL;
4. 隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
【結果判斷】
繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
【試劑盒性能】
1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 ng/L。
3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4. 重復性:板內、板間變異系數均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6個月
【ELISA試劑盒組成部分】
試劑盒組成 | 48 孔配置 | 96 孔配置保存 |
說明書 | 1份 |
|
封板膜 | 2 片(48) | 2 片(96) |
密封袋 | 1個 | 1個 |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 |
標準品 | 225nmol/L 0.5ml×1 瓶 | 0.5ml×1 瓶 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 | 1.5ml×1 瓶 |
酶標試劑 | 3 ml×1 瓶 | 6 ml×1 瓶 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1 瓶 | 6 ml×1 瓶 |
顯色劑A液 | 3 ml×1 瓶 | 6 ml×1 瓶 |
顯色劑B液 | 3 ml×1 瓶 | 6 ml×1 瓶 |
終止液 | 3ml×1 瓶 | 6ml×1 瓶 |
濃縮洗滌液 | (20ml×20 倍)×1 瓶 | (20ml×30 倍)×1 瓶 |
【注意事項】
⑴ 嚴格按照牛熱休克轉錄因子(HSF)ELISA試劑盒哪家好說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
⑵ 加樣后及時放人孵箱。標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。
(3)封板溫育時,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發,產生周邊現象從而導致“花板”的出現。
(4)用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產生拖帶現象而導致“花板”的出現。
(5)合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
(6)加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
(7)顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
(8)加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應避免接觸金屬器械。加終止液時應避免產生氣泡。
(9)應保證C清潔,整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至限度。從而提高檢測的特異性。并得到更準確、可靠的實驗結果。
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