上海閎巨優(yōu)惠供應(yīng)牛堿性磷酸酶(ALP)ELISA分析試劑盒說明書，并提供試劑盒價格、用途、規(guī)格、實驗原理、說明書、相關(guān)實驗操作等詳細(xì)信息。閎巨牛堿性磷酸酶(ALP)ELISA分析試劑盒說明書等各種ELISA試劑盒均采用的是定量夾心酶聯(lián)免疫技術(shù)。抗體具體為FGF6已經(jīng)被預(yù)先涂到微孔板。標(biāo)準(zhǔn)和樣品吸入井和任何FGF6目前被綁定的固定化抗體。*共軛的抗體特異性FGF6除去任何未結(jié)合的物質(zhì)后，加入到孔中。抗*蛋白共軛的辣根過氧化物酶（HRP）的洗滌后，加入到孔中。經(jīng)過洗滌，以除去任何未結(jié)合的抗*蛋白的酶試劑，底物溶液加入到孔中，顯色成比例的量的初始步驟中的約束的FGF6。彩色顯影被停止并測量的顏色的強度。

   此種方法ELISA試劑盒，具有較高的靈敏度和特異性好，檢測鼠標(biāo)FGF6。觀察鼠標(biāo)FGF6和類似物之間無顯著交叉反應(yīng)或干擾。

【操作步驟】

　1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

　　2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

　　3.  待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加*40μL；

　　4.  隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

　　5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。

　　6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

　　7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

【結(jié)果判斷】

　　繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在Excel工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

【試劑盒性能】

　　1.  準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

　　2.  靈敏度：zui低檢測濃度小于1.0 ng/L。

　　3.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

　　4.  重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

　　5.  貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

　　6.  有效期：6個月

【ELISA試劑盒組成部分】

【注意事項】

　　⑴ 嚴(yán)格按照牛堿性磷酸酶(ALP)ELISA分析試劑盒說明書說明書進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30～60min。

　　⑵ 加樣后及時放人孵箱。標(biāo)本較多時，要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間，防止孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。

　　(3)封板溫育時，各孔一定要封嚴(yán)，防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā)，產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。

　　(4)用洗板機洗板時，保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干：還要防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。

　　(5)合理安排檢測量，以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。

　　(6)加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。

　(7)顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。

　(8)加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。

    (9)應(yīng)保證C清潔，整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至限度。從而提高檢測的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實驗結(jié)果。

【相關(guān)產(chǎn)品】

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