弧菌顯色培養基使用說明書 (CHROMagar Vibrio)
【包裝規格】
包裝形式 1L/瓶(可分裝零售)
【產品用途】
弧菌顯色培養基用于水產品及食物中毒樣品中弧菌特別是副溶血性弧菌的分離和鑒定。
【檢驗原理】
蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;蔗糖為可發酵的糖類;抑菌劑抑制大部分非弧菌細菌,氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑;混合色素與副溶血性弧菌、霍亂弧菌和創傷弧菌所對應的酶發生特異性反應,水解底物,釋放出顯色基團,在淡黃色平板上產生品紅色菌落(副溶血性弧菌)和綠-藍綠色的菌落(霍亂弧菌和創傷弧菌)。
【配方成分】
弧菌顯色培養基配方(每升) 含量:
蛋白胨、酵母浸出物8.0 鹽類 51.4 色素 0.3
瓊脂 15.0 PH 9.0±0.2
【使用方法】
1、取瓶內干粉,溶于1000ml蒸餾水或純水中,可根據需求按74.7g/L的比例擴大、縮小。
2、將上述干粉緩慢倒入蒸餾水中,充分攪拌溶解。
3、加熱至100℃并按常規不斷攪拌。混合物也可以在微波爐中加熱,用此法加熱,煮沸后混合物立即移出微波爐并輕輕攪拌,而后移入微波爐再加熱,直至瓊脂*溶解(大量氣泡代替泡沫產生,大約需要2分鐘)。
4、將培養基水浴冷卻至48℃,傾注于已滅菌的培養皿中,使其凝固,
5、成品培養基在室溫條件下可保存一天,在冰箱內可保存數周(避光,2-8℃)。
三、接種
劃線接種(如果培養基剛從冰箱中取出,要恢復至室溫后才能使用),37℃培養24小時。【結果】
初篩微生物 | 菌落色彩 |
副溶血性弧菌 | 紫紅色 |
創傷弧菌/霍亂弧菌 | 蘭綠色至土耳其蘭色 |
溶藻弧菌 | 無色 |
注:zui后的鑒定必須通過補充試驗。
★ 使用過的培養基需要在121℃滅菌至少20分鐘才可以按照有關規定丟棄
【儲存條件及保質期】
1.干粉需保存在15-30℃干燥環境中。
2.傾注好的培養劑在室溫可保存一天,4℃冰箱中避光可以貯存兩星期。
【注意事項】
1. 稱量時注意粉塵,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系統不適。
2. 干粉培養基使用后立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結塊。
3. 自制平板時需注意培養基的厚度,厚度過薄容易造成瓊脂水分保持性下降,開裂;因此,一般需要15-20mL(Φ90mm)體積培養基,平板培養基厚度至少為2mm。
4. 即用型成品平板應該盡量保持在2-8℃下保存且與存放容器冷凝管保持一定距離以避免凍損壞。產品多次在低溫與常溫之間變更會引起瓊脂的泌水,屬于正常現象。使用前應平衡至室溫且盡量在無菌干燥箱中預干燥。
【廢物處理】
檢測之后帶菌平板置于121℃下高壓滅菌30分鐘后處理。