微量 RNA 助沉劑0.1mL實驗方法產品及特點:
尿素-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Urea PAGE)是目前分離 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是單獨 配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1. 一站式,含有電泳所需要的所有試劑,即開即用,十分方便,免去了 實驗人員稱取有毒物品。
2. 靈活,可以根據需要配制各種濃度的 Urea-PAGE,以便對長度各異 的 RNA 進行電泳。
3. 電泳后可直接用于 UV 觀察、銀染、膠回收、Northern 雜交和放射自 顯影等。
4. 使用新型緩沖液,可以防止甘油的干擾。
微量 RNA 助沉劑0.1mL實驗方法產品介紹:
使用方法:
一、準備工作 1. 用固相 RNase 清除劑清潔工作的臺面和器皿(詳見該產品的使用手冊)。 2. 配制 1 X 電泳緩沖液 將適量的 10X 電泳緩沖液用 RNase-free 水稀釋 10 倍,得到 1X 電泳緩 沖液待用。 3. 配制 10%過硫酸銨溶液 精確稱取約 100 mg 過硫酸銨到一干凈的 1.5 mL 離心管中,按每 1 mg 過硫酸銨加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水,搖晃致溶, 立即使用。注意:放置時間不要超過一周。
二、配制凝膠 1. 估計所需要的凝膠溶液的體積,一般配制一塊 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的膠需要 15 mL 凝膠溶液,配制一塊 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的膠 需要 120 mL 凝膠溶液。 2. 新鮮的 40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液的配制:在裝有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入約 130 mL 自備的去離子水,然后將全部甲叉雙丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來以避免粉末有 毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低,不會溶解在這少量溶液中)。充 分搖晃混勻后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
3. 根據所需要的凝膠溶液的體積,在一的干凈的三角瓶中按下表加入各成分 (此處以配制 100mL 濃度為 15%的凝膠為例):
4. 攪拌并加熱到 40-50℃左右,直到尿素*溶解。
5. 冷卻到室溫后,將三角瓶接上真空系統抽真空處理 10-15 分鐘以充分去 除溶液中的氧氣(氧氣會降低聚合反應效率)。但如果實驗條件有限,此 步也可以省略。
6. 邊搖晃溶液變加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%過硫酸銨。注意:即 使選擇其他工作濃度的 Acrylamide/Bis,TEMED 和 10%過硫酸銨的用 量也不需要隨之改變。但如果配置的凝膠溶液的體積變化,TEMED 和 10%過硫酸銨的用量也要按比例改變。
7. 再充分搖晃約 30 秒后迅速灌膠,然后插入樣品梳。
8. 室溫放置 30-60 分鐘使膠凝固。
9. 將凝膠板放置在電泳裝置上后,在上下層分別加入適當量的 1X 電泳緩沖 液。如果不馬上使用,需要有濕紙將上樣孔端蓋住以防凝膠過度干燥。
10. 拔出梳子后用加樣槍吸取電泳緩沖液,充分將每個加樣空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和氣泡吹打出來。
〖保存〗:2~8℃,避光
4-氨基-3-肼基-5-巰基-1,2,4-三氮唑
〖英文名稱〗:AHMT;4-Amino-3-hydrazi,2,4-triazol-5-thiol;4-Amino-3-hydrazino-5-mercapto-1,2,4-triazole;Purpald
〖其他名稱〗:4-氨基聯基巰基-1,2,4-三氮雜茂;4-氨基-3-肼-5-巰基-1,2,4-三唑;4-氨基-3-肼基-5-巰基-1.2.4-三唑;4-氨基-3-聯氨-5-巰基-1.2.4三氮雜茂;4-氨基-5-肼基-1,2,4-三唑-3-硫醇
〖CAS號〗:1750-12-5
C2H6N6S=146.17
〖級別〗:AR
〖含量〗:≥98%
〖熔點〗:228~230℃
堿溶解試驗Solubility in 1mol/L NaOH solution:合格
甲醛靈敏性試驗:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色粉末
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)測定甲醛和其它反應性化學品的專一試劑。HPLC中衍生中性單糖
〖保存〗:RT
N-(4-氨基丁基)-N-乙基異魯米諾
Inorganicbacteria
卵黃亞碲酸鹽增菌液 與Baird-Parker瓊脂基礎合用,用于*選擇性培養 100ML*6 incubation media 卵黃亞碲酸鹽增菌液 與Baird-Parker瓊脂基礎合用,用于*選擇性培養 100ML*6
法氏檸檬酸桿菌 治療膽囊炎和食管癌。果樹病原菌,食用和藥用 支/瓶
MRSAgar
SabouraudBHIAgar
有機磷細菌培養基250g用于測定磷細菌肥料中磷細菌分解有機磷的的效能
EY lurite Enrichment incubation media EY lurite Enrichment
反曲殼 支/瓶
TCBS瓊脂平板(9cm)用于致病性弧菌的選擇性分離
高滲真菌學瓊脂 250g 用于高滲食品中酵母菌和霉菌檢測
BacterialorganoMedium
1%亞碲酸鹽溶液 用于*選擇性培養時的添加劑 20mL incubation media 1%亞碲酸鹽溶液 用于*選擇性培養時的添加劑 20mL
泛養副球菌 模式菌株 支/瓶
ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar
OsmophilicMycophileAgar
incubation media 5