微量 DNA 助沉劑0.1mL*使用方法:
一、準(zhǔn)備工作 1. 用固相 RNase 清除劑清潔工作的臺(tái)面和器皿(詳見該產(chǎn)品的使用手冊(cè))。 2. 配制 1 X 電泳緩沖液 將適量的 10X 電泳緩沖液用 RNase-free 水稀釋 10 倍,得到 1X 電泳緩 沖液待用。 3. 配制 10%過硫酸銨溶液 精確稱取約 100 mg 過硫酸銨到一干凈的 1.5 mL 離心管中,按每 1 mg 過硫酸銨加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水,搖晃致溶, 立即使用。注意:放置時(shí)間不要超過一周。
二、配制凝膠 1. 估計(jì)所需要的凝膠溶液的體積,一般配制一塊 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的膠需要 15 mL 凝膠溶液,配制一塊 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的膠 需要 120 mL 凝膠溶液。 2. 新鮮的 40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液的配制:在裝有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入約 130 mL 自備的去離子水,然后將全部甲叉雙丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來以避免粉末有 毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低,不會(huì)溶解在這少量溶液中)。充 分搖晃混勻后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
3. 根據(jù)所需要的凝膠溶液的體積,在一的干凈的三角瓶中按下表加入各成分 (此處以配制 100mL 濃度為 15%的凝膠為例):
4. 攪拌并加熱到 40-50℃左右,直到尿素*溶解。
5. 冷卻到室溫后,將三角瓶接上真空系統(tǒng)抽真空處理 10-15 分鐘以充分去 除溶液中的氧氣(氧氣會(huì)降低聚合反應(yīng)效率)。但如果實(shí)驗(yàn)條件有限,此 步也可以省略。
6. 邊搖晃溶液變加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%過硫酸銨。注意:即 使選擇其他工作濃度的 Acrylamide/Bis,TEMED 和 10%過硫酸銨的用 量也不需要隨之改變。但如果配置的凝膠溶液的體積變化,TEMED 和 10%過硫酸銨的用量也要按比例改變。
7. 再充分搖晃約 30 秒后迅速灌膠,然后插入樣品梳。
8. 室溫放置 30-60 分鐘使膠凝固。
9. 將凝膠板放置在電泳裝置上后,在上下層分別加入適當(dāng)量的 1X 電泳緩沖 液。如果不馬上使用,需要有濕紙將上樣孔端蓋住以防凝膠過度干燥。
10. 拔出梳子后用加樣槍吸取電泳緩沖液,充分將每個(gè)加樣空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和氣泡吹打出來。
微量 DNA 助沉劑0.1mL*產(chǎn)品及特點(diǎn):
尿素-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Urea PAGE)是目前分離 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是單獨(dú) 配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1. 一站式,含有電泳所需要的所有試劑,即開即用,十分方便,免去了 實(shí)驗(yàn)人員稱取有毒物品。
2. 靈活,可以根據(jù)需要配制各種濃度的 Urea-PAGE,以便對(duì)長(zhǎng)度各異 的 RNA 進(jìn)行電泳。
3. 電泳后可直接用于 UV 觀察、銀染、膠回收、Northern 雜交和放射自 顯影等。
4. 使用新型緩沖液,可以防止甘油的干擾。
產(chǎn)品介紹:
C9H6O2=146.14
〖級(jí)別〗:BR
〖含量〗:≥97%
〖熔點(diǎn)〗:117~124℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:黃色粉末或結(jié)晶。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
4-芐基氨基-7-硝基苯并氧雜惡二唑
〖英文名稱〗:BBD;7-Benzylamino-4-nitrobenz-2-oxa-1,3-diazole;4-Benzylamino-7-nitrobenzofurazan
〖其他名稱〗:4-芐氨基-7-硝基苯并-2-氧雜-1,3-二唑;4-芐基氨基-7-硝基苯并-2-氧雜-1,3-二唑
〖CAS號(hào)〗:18378-20-6
C13H10N4O3=270.25
〖級(jí)別〗:BR
〖含量〗:≥98%
〖熔點(diǎn)〗:206~209℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:棕色粉末
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)蛋白質(zhì)熒光探針
解磷細(xì)菌培養(yǎng)基250g用于解磷細(xì)菌的分離培養(yǎng)
營(yíng)養(yǎng)肉湯 非苛養(yǎng)要求微生物的普通培養(yǎng) 500g incubation media 營(yíng)養(yǎng)肉湯 非苛養(yǎng)要求微生物的普通培養(yǎng) 500g
蛾微桿菌 支/瓶
Baird-Parker瓊脂平板(9cm)用于*的選擇性分離培養(yǎng)
YM11瓊脂 250g 濾膜法用于霉菌,酵母菌的分離培養(yǎng)(NEOGEN)
Phosphate-solubilizingbacteriamedium
Nutrient Broth incubation media Nutrient Broth
惡臭醋酸桿菌混濁變種 醬油酵母 支/瓶
Baird-ParkerAgarBase
YM11Agar
固氮根瘤菌培養(yǎng)基250g用于固氮菌的分離培養(yǎng)
營(yíng)養(yǎng)瓊脂 培養(yǎng)多種微生物 500g incubation media 營(yíng)養(yǎng)瓊脂 培養(yǎng)多種微生物 500g
惡臭假單胞菌 支/瓶
孟加拉紅培養(yǎng)基平板(9cm)用于食品中霉菌及酵母菌總數(shù)測(cè)定
OGY瓊脂 250g 用于霉菌和酵母菌分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
Nitrogen-fixingRhizobiummedium
Nutrient Agar incubation media Nutrient Agar
發(fā)根根瘤菌 除光學(xué)儀器外的防霉試驗(yàn)菌種。 支/瓶
RoseBengalMedium
OGYAgar
聯(lián)合固氮菌培養(yǎng)基250g用于固氮菌的分離培養(yǎng)
麥芽浸出液瓊脂 分離計(jì)數(shù)酵母和霉菌 500g incubation media 麥芽浸出液瓊脂 分離計(jì)數(shù)酵母和霉菌 500g
發(fā)根土壤桿菌(發(fā)根植物單胞菌) 支/瓶
牛津瓊脂(OXA)平板(9cm)用于單增李氏菌的選擇性分離
WL營(yíng)養(yǎng)瓊脂 250g 用于啤酒和發(fā)酵產(chǎn)品中酵母菌和細(xì)菌的計(jì)數(shù)
Combinednitrogen-fixingbacteriamedium
Malt Extract Agar incubation media Malt Extract Agar
發(fā)光假蜜環(huán)菌 氧化乙醇產(chǎn)醋酸量高 支/瓶
OxfordAgarBase
WLNutrientAgar
固氮菌用阿須貝氏培養(yǎng)基250g用于固氮菌的分離培養(yǎng)
Fluid Lactose Medium incubation media Fluid Lactose Medium
發(fā)酵乳桿菌 質(zhì)量控制菌株 支/瓶
PALCAM瓊脂平板(9cm)用于單增李氏菌選擇性分離
改良沙氏瓊脂培養(yǎng)基 250g 用于真菌培養(yǎng)
Nitrogen-fixingbacteriawiththeASugai’smedium
Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ) 與卵黃亞碲酸鹽增菌液合用,用于*選擇性培養(yǎng) 500g incubation media Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ) 與卵黃亞碲酸鹽增菌液合用,用于*選擇性培養(yǎng) 500g
發(fā)酵纖維單胞菌 produces isoprene 支/瓶
PALCAMAgar
Sabouraud'sAgar,Modified
無機(jī)磷細(xì)菌培養(yǎng)基250g用于測(cè)定磷細(xì)菌肥料中磷細(xì)菌分解無機(jī)磷的效能
Baird-Parker Agar Base incubation media Baird-Parker Agar Base
發(fā)酵性酵母 支/瓶
MRS瓊脂平板(9cm)用于食品中乳酸菌總數(shù)測(cè)定
沙氏BHI瓊脂 250g 用于真菌檢測(cè)
0010 瓊脂粉 BR 250 g