微量核酸沉淀劑10mL實驗方法產品及特點:
尿素-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Urea PAGE)是目前分離 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是單獨 配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1. 一站式,含有電泳所需要的所有試劑,即開即用,十分方便,免去了 實驗人員稱取有毒物品。
2. 靈活,可以根據需要配制各種濃度的 Urea-PAGE,以便對長度各異 的 RNA 進行電泳。
3. 電泳后可直接用于 UV 觀察、銀染、膠回收、Northern 雜交和放射自 顯影等。
4. 使用新型緩沖液,可以防止甘油的干擾。
微量核酸沉淀劑10mL實驗方法產品介紹:
使用方法:
一、準備工作 1. 用固相 RNase 清除劑清潔工作的臺面和器皿(詳見該產品的使用手冊)。 2. 配制 1 X 電泳緩沖液 將適量的 10X 電泳緩沖液用 RNase-free 水稀釋 10 倍,得到 1X 電泳緩 沖液待用。 3. 配制 10%過硫酸銨溶液 精確稱取約 100 mg 過硫酸銨到一干凈的 1.5 mL 離心管中,按每 1 mg 過硫酸銨加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水,搖晃致溶, 立即使用。注意:放置時間不要超過一周。
二、配制凝膠 1. 估計所需要的凝膠溶液的體積,一般配制一塊 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的膠需要 15 mL 凝膠溶液,配制一塊 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的膠 需要 120 mL 凝膠溶液。 2. 新鮮的 40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液的配制:在裝有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入約 130 mL 自備的去離子水,然后將全部甲叉雙丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來以避免粉末有 毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低,不會溶解在這少量溶液中)。充 分搖晃混勻后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
3. 根據所需要的凝膠溶液的體積,在一的干凈的三角瓶中按下表加入各成分 (此處以配制 100mL 濃度為 15%的凝膠為例):
4. 攪拌并加熱到 40-50℃左右,直到尿素*溶解。
5. 冷卻到室溫后,將三角瓶接上真空系統抽真空處理 10-15 分鐘以充分去 除溶液中的氧氣(氧氣會降低聚合反應效率)。但如果實驗條件有限,此 步也可以省略。
6. 邊搖晃溶液變加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%過硫酸銨。注意:即 使選擇其他工作濃度的 Acrylamide/Bis,TEMED 和 10%過硫酸銨的用 量也不需要隨之改變。但如果配置的凝膠溶液的體積變化,TEMED 和 10%過硫酸銨的用量也要按比例改變。
7. 再充分搖晃約 30 秒后迅速灌膠,然后插入樣品梳。
8. 室溫放置 30-60 分鐘使膠凝固。
9. 將凝膠板放置在電泳裝置上后,在上下層分別加入適當量的 1X 電泳緩沖 液。如果不馬上使用,需要有濕紙將上樣孔端蓋住以防凝膠過度干燥。
10. 拔出梳子后用加樣槍吸取電泳緩沖液,充分將每個加樣空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和氣泡吹打出來。
〖英文名稱〗:Thiazole Orange;1-Methyl-4-[(3-methyl-2(3H)-benzothiazolylidene)methyl]quinolinium p-tosylate
〖CAS號〗:107091-89-4
C26H24N2O3S2=476.61
〖級別〗:BR
有效分光〖含量〗:~90%
消光系數Extinction Coefficient:≥65000 (波長Wavelength501-513nm)
消光系數Extinction Coefficient:≥10000 (波長Wavelength286-290nm)
消光系數Extinction Coefficient:≥28000 (波長Wavelength235-239nm)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:橙色或紅橙色粉末,〖熔點〗270℃
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
2-氨基吖啶酮
〖英文名稱〗:AMAC;2-Aminoacridone;2-Ami0H-acridin-9-one
〖CAS號〗:27918-14-5
C13H10N2O=210.23
〖級別〗:BR
〖含量〗:≥98%(HPLC)
熒光性:λex 420 nm; λem 538 nm in 0.1 M Tris pH 8.0
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:粉末。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)適合熒光性研究
〖保存〗:RT
金黃三羧酸
〖英文名稱〗:ATA;Aurintricarboxylic acid
〖其他名稱〗:金精三羧酸
〖CAS號〗:4431-00-9
克氏瓊脂250g用于銅綠假單胞菌的克氏試驗
胰蛋白大豆瓊脂 用于無菌試驗和多種菌的計數和分離培養 500g incubation media 胰蛋白大豆瓊脂 用于無菌試驗和多種菌的計數和分離培養 500g
大豆根瘤菌 測定*12 支/瓶
TSA培養基平板(9cm)用于環境、器皿、設備和表面的無菌檢測
Egg-YolkSaltAgarBase
Kligler'sAgar
Tryptic Soy Agar (Soybean-Casein Digest Agar Medium) incubation media Tryptic Soy Agar (Soybean-Casein Digest Agar Medium)
大豆慢生根瘤菌 檢測用菌 支/瓶
TSA
抗生素檢定培養基2號(低PH)(05藥典) 250g 用于四環素,*等效價測定
鐵瓊脂250g用于產硫化氫細菌計數
馬鈴薯葡萄糖瓊脂 霉菌和酵母菌的培養及計數 500g incubation media 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 霉菌和酵母菌的培養及計數 500g
大麗花輪枝孢 快生型 支/瓶
RODAC接觸皿(TSA)(6.5cm)用于環境、器皿、設備和表面的無菌檢測
AntibioticAgarNO.2
*瓊脂培養基250g用于紡織品微真菌影響評價試驗
Potato Dextrose Agar incubation media Potato Dextrose Agar
大霉 細菌肥料 支/瓶
RODAC
2010版中國藥典培養基
CompleteAgarMedium
磷酸緩沖液pH7.2 緩沖液和溶液 500g incubation media 磷酸緩沖液pH7.2 緩沖液和溶液 500g
大球蓋菇 棉花黃萎病菌。 支/瓶
平板計數瓊脂平板(9cm)標準平板計數瓊脂,含糖,用于細菌總數的測定
察氏瓊脂 250g 用于青霉,曲霉鑒定及保存菌種用(GB標準)
L型細菌高滲鹽*250g用于L型細菌增菌培養
Phosphate Buffer, pH 7.2 incubation media Phosphate Buffer, pH 7.2
大禿馬勃 支/瓶
PlateCountAgar
CzapekDoxAgar
L-BacterialHypertonicSaltBroth
緩沖鈉-蛋白胨溶液pH7.0 緩沖液和溶液 500mL*10 incubation media 緩沖鈉-蛋白胨溶液pH7.0 緩沖液和溶液 500mL*10
戴爾根霉 食用。 支/瓶
營養瓊脂平板(9cm)細菌計數、不含糖,可作血瓊脂基礎和傳代用
產毒培養基 250g 用于青霉,曲霉的產毒培養
葡萄糖酸鹽20支綠膿桿