Sephadex G50 介質10mL實驗方法產品介紹：

Sephadex G50 介質10mL實驗方法使用方法: 
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑：7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液： 成分 加入的體積 自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 滅菌的超純水 補足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5～10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
7. 離心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注：通過第 5～8 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP，如要 *將其除去時，乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質時，請在第
8 步之后進行。
磷酸化反應標記：
A. 去磷酸化反應
1. 實驗前需自備的試劑：TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量離心管中制備下列反應液： 成分 加入的體積 自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶 （CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 滅菌的超純水 補足到 150 μL
3. 50℃反應 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//（25：24：1），充分混勻。
5. 離心，取上層（水層）移到另一個微量離心管中。
6. 重復操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui終濃度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
9. 離心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。 

10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
磷酸化反應（前反應）：
1. 在微量離心管中制備下列反應液：

2. 37℃反應 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標記：
當摻入水平很低的時候，需要使用本步驟，即通過體積排阻色譜或過濾試 劑盒除去未反應的標記。Sephadex G-50 層析柱（需另購）對于去除未摻入 的 dNTPs 效果很好，它還能大幅減少小于 20 個堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5～10 分鐘以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長度不小于 10 個 堿基的寡核苷酸。

PotatoDextroseAgar(Chloramphenicol)
孟加拉紅(虎紅)培養基 250(g) incubation media 孟加拉紅(虎紅)培養基 250(g)
超級肉湯 Super Broth 250克 BR
CIN-基礎250用于分離小腸結腸炎耶爾森氏菌(GB標準)incubationmediaCIN-基礎250用于分離小腸結腸炎耶爾森氏菌(GB標準)
CC瓊脂添加劑 1ml*5支 每支添加于100mlCC瓊脂中
BIGGY瓊脂250g用于念珠菌的分離培養和計數
孟加拉紅(虎紅)培養基 1000(g) incubation media 孟加拉紅(虎紅)培養基 1000(g)
超級瓊脂 Super Agar 250克 BR
消毒滅菌效果評價incubationmedia消毒滅菌效果評價
CCAgarSupplement
BIGGYAgar
KF鏈球菌瓊脂 100(g) incubation media KF鏈球菌瓊脂 100(g)
TYGPN培養基 TYGPN Medium 250克 BR
營養肉湯(NB)250一般細菌培養,轉種,復壯,增菌等.也可用于消毒效果測定incubationmedia營養肉湯(NB)250一般細菌培養,轉種,復壯,增菌等.也可用于消毒效果測定
纖維二糖-*(CC)瓊脂 250g 用于創傷弧菌分離培養基
0-玉米瓊脂培養基250g用于白色念珠菌產芽管試驗。
KF鏈球菌瓊脂 100(g) incubation media KF鏈球菌瓊脂 100(g)
印度墨水 Indian ink 100毫升 炭疽桿菌檢測用配套試劑
營養瓊脂(NA)250細菌計數(GB標準),不含糖,可作血瓊脂基礎,傳代用.也可用于消毒效果測定incubationmedia營養瓊脂(NA)250細菌計數(GB標準),不含糖,可作血瓊脂基礎,傳代用.也可用于消毒效果測定
Cellobiose-polymyxinEAgar
en80-CornMeatAgarMediun
BCYE瓊脂基礎 100(g) incubation media BCYE瓊脂基礎 100(g)
碘附 Iodophor 500克 炭疽桿菌檢測用配套試劑
普通肉湯培養基250用于*的增菌培養(SN、GB標準)，也可用于消毒效果測定incubationmedia普通肉湯培養基250用于*的增菌培養(SN、GB標準)，也可用于消毒效果測定
*雙水解酶試驗用培養基(AD) 5g 生化培養基，用于弧菌的*試驗
SDAY培養基250g用于真菌的分離培養
GVPC瓊脂基礎 100(g) incubation media GVPC瓊脂基礎 100(g)
Campy-Cefex添加劑 Campy-Cefex Supplement 2毫升×10支 添加于200ml CAMPY-CEFEX瓊脂基礎中
一次性衛生用品檢驗incubationmedia一次性衛生用品檢驗
AagininedehydrolaseMedium
SDAYMedium
GVPC添加物 5支/盒 incubation media GVPC添加物 5支/盒
多項目尿液化學分析控制品 多項目尿液化學分析控制品 10毫升×6支
0.5%*250用于環氧乙烷消毒和電離輻射消毒過程監測指示菌(枯草桿菌色變種芽孢及短小桿菌芽孢)的培養(GB標準)incubationmedia0.5%*250用于環氧乙烷消毒和電離輻射消毒過程監測指示菌(枯草桿菌色變種芽孢及短小桿菌芽孢)的培養(GB標準)
嗜鹽性試驗用胰胨水 250g 用于弧菌的嗜鹽試驗
麥芽浸膏瓊脂200g用于霉菌和酵母菌的分離培養和計數
胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA) 250(g) incubation media 胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA) 250(g)
氰化高鐵血紅蛋白參比液(100g/L) Cyanomethemoglobin reference solution 10毫升×8支
溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養基250用于壓力蒸氣消毒過程監測指示菌(嗜熱脂肪桿菌芽孢)的培養及消毒效果測定incubationmedia溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養基250用于壓力蒸氣消毒過程監測指示菌(嗜熱脂肪桿菌芽孢)的培養及消毒效果測定
Halophilicexperimentalmedium
MaltExtractAgar
改良平板計數瓊脂(MPCA) 250(g) incubation media 改良平板計數瓊脂(MPCA) 250(g)
氰化高鐵血紅蛋白參比液(150g/L) Cyanomethemoglobin reference solution 10毫升×8支
液體沙氏培養基250用于真菌、酵母菌增菌incubationmedia液體沙氏培養基250用于真菌、酵母菌增菌
副溶血性弧菌成套生化鑒定管(HRGB) 9種*2套/盒*5盒 用于副溶血性弧菌生化鑒定試驗
皮膚癬菌鑒別瓊脂(DTM)250g用于皮膚癬菌鑒別培養
Honda氏產毒肉湯基礎 250(g) incubation media Honda氏產毒肉湯基礎 250(g)
氰化高鐵血紅蛋白參比液(4種×2套) Cyanomethemoglobin reference solution 10毫升×8支
沙氏瓊脂培養基250用于衛生用品的真菌檢測incubationmedia沙氏瓊脂培養基250用于衛生用品的真菌檢測
革蘭氏染色液 5ml*8 用于細菌的革蘭氏染色試驗

〖英文名稱〗：5-Nitro-1，10-phenanthroline；5-Nitro-1,10-phenanthroline 
〖其他名稱〗：5-硝基-1,10-菲啰啉；5-硝基-1,10-菲咯啉；5-硝基-1,10-鄰二氮雜菲；5-硝基鄰二氮雜菲；5-硝基-1,10-菲咯啉；5-硝基-1,10-菲羅啉；5-硝基-1,10-鄰菲羅啉
〖CAS號〗：4199-88-6
C12H7N3O2?xH2O= 225.20 (anhydrous basis)
〖級別〗：AR
〖含量〗：≥98.0%
〖熔點〗：200～203℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：黃色或橙色結晶粉末
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗
〖保存〗：RT
鄰苯二酚紫
≥70%