去離子甲酰胺100mL圖片產品介紹:
去離子甲酰胺100mL圖片使用方法:
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液: 成分 加入的體積 自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶(10 U/μL) 1 μL 滅菌的超純水 補足到 25 μL 注:5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。 8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質時,請在第
8 步之后進行。
磷酸化反應標記:
A. 去磷酸化反應
1. 實驗前需自備的試劑:TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)等 2. 在微量離心管中制備下列反應液: 成分 加入的體積 自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl,pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶 (CIAP,10~20 U/μL)
2 μL 滅菌的超純水 補足到 150 μL
3. 50℃反應 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//(25:24:1),充分混勻。
5. 離心,取上層(水層)移到另一個微量離心管中。
6. 重復操作 4~5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl(zui終濃度 150 mM)。
8. 加入 375 μL(2.5 倍量)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
9. 離心回收沉淀,用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后,沉淀真空干燥。
10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
磷酸化反應(前反應):
1. 在微量離心管中制備下列反應液:
2. 37℃反應 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標記:
當摻入水平很低的時候,需要使用本步驟,即通過體積排阻色譜或過濾試 劑盒除去未反應的標記。Sephadex G-50 層析柱(需另購)對于去除未摻入 的 dNTPs 效果很好,它還能大幅減少小于 20 個堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5~10 分鐘以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長度不小于 10 個 堿基的寡核苷酸。
Ordinaryagarslantmedium
指示選擇性培養基基礎 250(g) incubation media 指示選擇性培養基基礎 250(g)
李氏LPM瓊脂 LPM Agar 250克 單增李氏菌的選擇性分離
鈉血瓊脂基礎250用于副溶血性弧菌的溶血試驗incubationmedia鈉血瓊脂基礎250用于副溶血性弧菌的溶血試驗
含225mlGN增菌液均質袋 10個/包 用于志賀氏菌的增菌培養,亦可用于沙門氏菌增菌培養。
酪胨瓊脂250g用于藥品,生物制品無菌試驗
PLET瓊脂基礎 250(g) incubation media PLET瓊脂基礎 250(g)
Half Fraser培養基 Half Fraser Medium 250克 李氏菌的增菌培養
霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA)250用于霍亂弧菌的生化試驗(SN標準)incubationmedia霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA)250用于霍亂弧菌的生化試驗(SN標準)
四硫磺酸鹽煌綠增菌液(TTB肉湯) 10ml/支*20支 用于沙門氏菌選擇性增菌培養。
PeptonefromCaseinAgar
快速硫化氫試驗瓊脂 250(g) incubation media 快速硫化氫試驗瓊脂 250(g)
SIM培養基 Motility Test Medium(Semisolid) 250克 李氏菌動力觀察,H抗原位相變異試驗;硫化氫、動力、吲哚試驗
T脂250用于霍亂弧菌的培養(SN標準)incubationmediaT脂250用于霍亂弧菌的培養(SN標準)
TetrathionateBroth
〖保存〗:RT
鈣黃綠素二鈉鹽
〖英文名稱〗:Calcein disodium salt;Bis[N,N-di(carboxymethyl)aminomethyl]fluorescein disodium salt, Fluorescein-bismethyliminodiacetic acid disodium salt
〖其他名稱〗:鈣黃綠素鈉鹽
〖CAS號〗:108750-13-6
C30H24N2Na2O13=666.50
〖級別〗:BS〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:橙色或棕色粉末或晶體,溶于水
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
鉻黑T
〖英文名稱〗:Eriochrome black T;1-(1-Hydroxy-2-naphthylazo)-6-nitro-2-naphthol-4-sulfonic acid sodium salt;C.I.Mordant black II;C.I. 14645
〖其他名稱〗:依來鉻黑T;羊毛鉻黑T;媒介黑T;酸性媒介黑T;1-(1-羥基-2-萘偶氮)-6-硝基-2-萘酚-4-磺酸鈉
〖CAS號〗:1787-61-7
C20H12N3NaO7S=461.38
〖級別〗:IND
靈敏度試驗:合格